ABSTRACT

Objective: To establish a GC method for the determination of residual solvent in clofedanol. Methods: DB-624 chromatographic column (coated with 6% cyanopropylphenyl-94% dimethylpolysiloxane, length 30 m, I.D. 0.53 mm, film 3.0 μm) was adopted. The column temperature was programmed, kept at 40˚C for 3 min, and then increased by 20˚C/min to 240˚C for 3 min. The temperature of FID detector was 250˚C and the temperature of inlet was 200˚C. The carrier gas was He at a flow rate of 5 mL/min. The injection volume was 1 mL. Results: The calibration curves of five solvents all showed good linearity in a detected concentration range (r > 0.9990); the range of average recovery was between 96.0% and 103.0%. Conclusion: The method was accurate, reliable and sensitive, and can be used for assay of residual organic solvent in clofedanol.

Keywords:GC, Clofedanol, Residual Solvent

顶空气相色谱法测定氯苯达诺原料药中的残留溶剂含量

王琳，丁海宏，张智红^*，胡丽

江苏宝众宝达药业有限公司，江苏 南通

Email: ^*418424910@qq.com

收稿日期：2015年7月10日；录用日期：2015年7月23日；发布日期：2015年7月31日

摘 要

目的：建立顶空气相色谱法检验氯苯达诺盐酸盐原料药中残留溶剂的方法。方法：采用6%氰丙基苯基- 94%二甲基聚硅氧烷为固定液的毛细管柱(DB-624, 0.53 mm × 30 m, 3.0 μm)，程序升温，初始温度40℃，保持3 min，以20℃/min的速率升温至240℃，保持3 min；氢火焰离子化检测器(FID)，检测器温度250℃，进样口温度200℃，载气为氦气，流速5 mL/min，进样体积1 mL。分流比1:1。结果：5种有机溶剂(甲醇、乙醇、乙腈、苯、甲苯)进样浓度与峰面积呈良好线性关系，相关系数均大于0.9990，加样回收率在96.0%~103.0%之间。结论：此法准确可靠，灵敏度高，可用于氯苯达诺中残留溶剂的测定。

关键词 :顶空色谱法，氯苯达诺，残留溶剂

1. 引言

氯苯达诺除有中枢性镇咳作用外，还有抗组织胺作用和阿托品样作用，能减轻支气管痉挛和粘膜充血性水肿。适用于呼吸道急性感染引起的干咳或阵咳，常与祛痰药合用。在氯苯达诺的合成过程中用的溶剂有苯、甲苯、甲醇、乙醇、乙腈，这些溶剂在成品中不可避免的会残留，根据中国药典及ICH (International Conference on Harmonization of Technical Requirements for Registration of Pharmaceuticals for Human Use)，人用药品注册技术要求国际协调会)对溶剂残留有限度规定，故本文研究了测定氯苯达诺残留溶剂含量的方法。

2. 仪器与试药

Agilent 7890N气相色谱仪(美国安捷伦)；Agilent 7694E顶空进样器(美国安捷伦)；毛细管柱：DB-624 (30 m × 0.53 mm, 3.0 μm)；苯、甲苯、无水甲醇、乙醇、乙腈均为分析纯，N,N-二甲基甲酰胺(以下简称DMF)为色谱纯；氯苯达诺(生产单位为江苏宝众宝达药业有限公司，批号：1041210001、1041210002、1041210003)。

3. 方法与结果

3.1. 溶液制备

对照储备溶液制备：精密称取乙腈205 mg，甲苯445 mg，无水甲醇1500 mg，无水乙醇2500 mg，苯溶液(1 mg/mL) 1.0 mL，置于100 mL容量瓶中，用DMF水溶液(10→100)稀释至刻度，摇匀。

对照溶液制备：精密移取1.0 mL对照储备溶液于100 mL容量瓶中，加DMF水溶液(10→100)，稀释至刻度，摇匀即得，精密移取10.0 mL置于顶空瓶中。

供试品溶液制备：取氯苯达诺约0.5 g，精密称定，加DMF水溶液(10→100) 10 mL，溶解，作为供试品溶液。

3.2. 色谱条件

DB-624毛细管柱，FID (火焰离子化，Flame ionization Detector)检测器，检测器温度250℃，进样口温度200℃；载气为氦气，纯度99.99%，流速5 mL/min；采用程序升温，初始温度40℃，保持3 min，以20℃/min的速率升温至240℃，保持3 min；顶空瓶平衡温度80℃，平衡时间25 min，进样量1 mL；定量环温度120℃，传输线温度130℃ [1] 。

3.3. 系统适用性与精密度试验

记录色谱图，5种溶剂分离度良好，见图1，经验证出峰顺序为甲醇、乙醇、乙腈、苯、甲苯；各峰之间的分离度依次为2.2、10.6、10.6、12.0、8.1，分离度均大于1.5，色谱峰完全分离；其峰面积的相对标准偏差(RSD)分别为4.4%、4.5%、3.7%、2.5%、8.1%，峰保留时间的相对标准偏差(RSD)分别为0.02%、0.01%、0.01%、0.01%、0.02%，表明仪器精密度良好，方法重现性好。

3.4. 线性关系及检测限试验

分别精密量取对照品贮备液200 μl，150 μl，100 μl，50 μl，10 μl，5 μl，置于顶空进样瓶中，再分别精密量取10 mL DMF水溶液(10→100)，混匀，按3.2项下的色谱条件进样，记录色谱图，以浓度(C)对峰面积(A)进行线性回归，结果见表1。

通过逐级稀释降低浓度，进样测定，测得甲醇、乙醇、乙腈、苯、甲苯的检测限分别为0.171 μg/mL、0.425 μg/mL、0.0699 μg/mL、0.0127 μg/mL、0.00585 μg/mL，折算成样品中的含量分别为3.4 μg/g，8.5 μg/g，1.4 μg/g，0.03 μg/g，0.12 μg/g。

3.5. 回收率

分别各配制测定限度的50%，100%，150%加入对照溶液的样品溶液，按3.2项下的色谱条件，按外标法计算，甲醇、乙醇、乙腈、苯、甲苯平均回收率分别为98.8%、99.6%、100.7%、101.8%、100.5%，RSD分别为5.3%、6.5%、2.8%、9.4%、7.2%。

3.6. 重复性试验

取同一批供试品(批号：1041210001)，共6份，按3.1项的方法制备供试品溶液，按3.2色谱条件进样，记录色谱图，按外标法计算样品中甲醇、乙醇、乙腈、苯、甲苯的残留量分别为290 μg/g、89 μg/g、未检出、未检出、5 μg/g，RSD分别为5.6%、4.2%、未检出、未检出、5.7%。

图1. 对照品色谱图

表1. 线性回归方程和线性范围测定结果

表2. 样品测定结果

3.7. 样品测定

取氯苯达诺3批(批号：1041210001、1041210002、1041210003)，按3.1项的方法制备供试品溶液，按3.2色谱条件进样，记录色谱图，按外标法计算样品中各溶剂的残留量，3批样品的测定结果见表2。

4. 小结

4.1. 平衡温度的选择

通常较高的平衡温度可提高灵敏度，减少平衡时间，但通过高温度会导致供试品及残留溶剂分解或发生其他变化，还可引起顶空的耐压和气密性等问题，增大分析误差。本文预试一系列温度，80℃比较适宜[2] 。

4.2. 平衡时间的选择

考察了20 min，25 min，30 min，40 min等不同平衡时间对结果的影响，表明了30 min后峰面积基本不再增大，故选择30 min为平衡时间。

文章引用

王 琳,丁海宏,张智红,胡 丽. 顶空气相色谱法测定氯苯达诺原料药中的残留溶剂含量
Determination of Residual Solvent in Clofedanol by Gas Chromatography with Headspace Sampling[J]. 药物资讯, 2015, 04(03): 31-34. http://dx.doi.org/10.12677/PI.2015.43004

参考文献 (References)