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Advances in Clinical Medicine
Vol. 12  No. 08 ( 2022 ), Article ID: 54944 , 14 pages
10.12677/ACM.2022.1281105

基于网络药理学及分子对接预测乌梅丸治疗 腹泻型肠易激综合征的作用机制

朱港星1，曹生海2*，黎洁1，马忠义1，张成宇1

1青海大学，青海省糖脂代谢疾病防控中医药重点实验室，青海 西宁

2青海省中医院，青海 西宁

收稿日期：2022年7月17日；录用日期：2022年8月12日；发布日期：2022年8月19日

摘要

目的：基于网络药理学及分子对接技术预测乌梅丸治疗IBS-D的潜在作用机制。方法：通过TCMSP数据库筛选乌梅丸有效成分及靶点；检索GeneCards、DisGeNET、NCBI Gene、DrugBank数据库获取IBS-D相关靶点，得到药物–疾病共有靶点；利用String数据库建立蛋白质互作(PPI)网络；利用Cytoscape3.7.1软件构建“药物–有效成分–靶点”网络；利用Metascape数据库进行基因本体论(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)分析；利用AutoDock和PyMOL软件进行分子对接和结果可视化。结果：最终得到乌梅丸有效成分67个，药物靶点205个；疾病靶点2327个，两者交集靶点148个；GO功能富集分析中生物过程(BP)得到1509条，分子功能(CC)得到95条，细胞成分(MF)得到167条；KEGG信号通路富集分析获得80条。结论：乌梅丸中槲皮素、山奈酚、β-谷甾醇、豆甾醇可能是治疗疾病的核心化合物，AKT1、L-6、IL-1β、VEGFA、EGFR等基因靶点是疾病的最佳靶点选项，乌梅丸治疗IBS-D可能通过参与炎症、细胞代谢及内分泌等相关反应和通路。

关键词

乌梅丸，腹泻型肠易激综合征，网络药理学，分子对接

Prediction of the Mechanism of Wumei Pill in Treating Diarrhea Irritable Bowel Syndrome Based on Network Pharmacology and Molecular Docking

Gangxing Zhu1, Shenghai Cao2*, Jie Li1, Zhongyi Ma1, Chengyu Zhang1

1Qinghai Provincial Key Laboratory of Traditional Chinese Medicine Research for Glucolipid Metabolic Diseases, Qinghai University, Xining Qinghai

2Qinghai Provincial Hospital of Traditional Chinese Medicine, Xining Qinghai

Received: Jul. 17th, 2022; accepted: Aug. 12th, 2022; published: Aug. 19th, 2022

ABSTRACT

Objective: To study the potential mechanism of Wumei Pill in treating IBS-D based on network pharmacology and molecular docking technology. Methods: The effective components and targets of Wumei Pill were screened by TCMSP database, to obtain relevant targets of IBS-D by retrieving the GeneCards, DisGeNET, NCBI Gene, and DrugBank databases, and obtain common targets of drugs diseases; Using String databases to establish protein interaction (PPI) networks. The network of “drugs-active ingredients-targets” was constructed by using Cytoscape3.7.1 software; Metascape database was used to analyze gene ontology (GO) and Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes (KEGG). AutoDock and PyMOL software are used for molecular docking and visualization of results. Results: There were 67 effective components and 205 drug targets in Wumei Pill. There are 2327 disease targets, and 148 intersection targets between them; In the functional enrichment analysis of GO, 1509 biological processes (BP), 95 molecular functions (CC) and 167 cellular components (MF) were obtained. 80 KEGG signal pathways were obtained by enrichment analysis. Conclusion: Quercetin, kaempferol, β-sitosterol and stigmasterol in Wumei Pill may be the core compounds for treating diseases, and gene targets such as AKT1, L-6, IL-1B, VEGFA and EGFR are the best target options for diseases. Wumei Pill may be involved in inflammation, cell metabolism and endocrine related reactions and pathways in treating IBS-D.

Keywords:Wumei Pill, Irritable Bowel Syndrome with Diarrhea, Network Pharmacology, Molecular Docking

Copyright © 2022 by author(s) and Hans Publishers Inc.

This work is licensed under the Creative Commons Attribution International License (CC BY 4.0).

http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/

1. 引言

肠易激综合征((Irritable bowel syndrome, IBS)是临床上最常见的一种功能性胃肠疾病(functional gastrointestinal disorders, FGID)，其中腹泻型肠易激综合征(irritable bowel syndrome with diarrhea, IBS-D)为最常见的亚型，主要临床症状表现为反复发作的腹痛、腹胀、腹泻。该病病情反复发作，严重影响患者的日常生活，大大降低患者的生活质量，还会给社会带来巨大的经济负担 [1]。

根据IBS-D患者临床表现，中医认为该病属于“腹痛”、“泄泻”范畴 [2]。目前，中医经方乌梅丸在临床治疗中取得确切疗效 [3] [4]，但作用机制研究尚不明确。现代实验研究表明 [5]，乌梅丸具有抗炎、调节免疫、促进胃肠功能恢复、调节肠道菌群等多种作用，故乌梅丸可能通过上述多种作用治疗IBS-D [6]。基于此，为求进一步明确乌梅丸治疗IBS-D的机制，本文通过网络药理学及分子对接技术对乌梅丸有效成分、作用靶点与IBS-D的关联关系及复杂作用机制做进一步研究，为中医药的创新发展及中药新药的研究提供新的科学依据。

2. 资料与方法

2.1. 乌梅丸有效成分及作用靶点基因的获取

利用TCMSP数据库(https://old.tcmsp-e.com/tcmsp.php)对乌梅丸中“乌梅、黄连、花椒、附子、黄柏、干姜、桂枝、人参、当归”为检索词进行活性成分筛选；设置筛选条件为：口服生物利用度(oral bioavailability, OB) ≥ 30%、类药性(drug-likeness, DL) ≥ 0.18；并在“Related Targets”模块获得乌梅丸的作用靶点基因，通过Uniprot数据库(https://www.uniprot.org/)进行标准化处理、去除重复值后，得到药物的作用靶点基因。

2.2. IBS-D靶点基因的获取

使用GeneCards数据库(https://www.genecards.org/)、DisGeNET数据库(https://www.disgenet.org/search)、NCBI Gene数据库(https://www.ncbi.nlm.nih.gov/)、DrugBank数据库(https://go.drugbank.com/)以“Irritable bowel syndrome with diarrhea”和“IBS-D”为检索词筛选疾病相关靶点基因。将疾病靶点基因导入Uniprot数据库对其进行标准化处理，去除重复值后得到疾病靶点基因。

2.3. 药物靶点及疾病靶点的交集获取

利用Venny2.1在线网站(https://bioinfogp.cnb.csic.es/tools/venny/)将步骤1.1及1.2中获得的药物作用靶点基因及疾病靶点基因进行取交集，并绘制韦恩图。

2.4. 构建乌梅丸治疗IBS-D的蛋白相互作用(PPI)网络

将步骤1.3中获得的交集靶点基因导入String数据库(https://string-db.org/)，物种设置为“Homo Sapiens”，蛋白相互作用分值为0.4，构建PPI网络图，并下载该网络图PNG格式图片文件及TSV格式文本文件。

2.5. IBS-D核心靶点基因的获取

将步骤1.4中PPI网络图的TSV格式文本文件导入CytoScape3.7.1软件，并通过内置软件Network Analyzer计算网络的中心度值(betweenness centrality, BC)、紧密中心度值(closeness centrality, CC)、节点连接度值(degree)获得疾病的核心靶基因点。

2.6. 绘制“药物–活性成分–靶点”网络图及药物核心活性成分的获取

通过使用Cytoscape3.7.1软件绘制“药物–活性成分–靶点”网络图，并利用内置工具Network Analyzer分析网络图的拓扑参数，依据节点degree值筛选药物的核心活性成分。

2.7. GO功能和KEGG信号通路富集分析

将交集靶点基因上传至Metascape数据库(http://metascape.org/gp/index.html)，物种设置为“Homo Sapiens”，选择“CustomAnalysis”，参数设置为最小重叠 > 3，值截止 < 0.01，最小富集 > 1.5。分别进行GO功能和KEGG信号通路富集分析，其中GO功能富集分析包括生物过程(biological process, BP)、细胞组分(cellular component, CC)、分子功能(molecular function, MF)。并对BP、CC、MF中最为显著的10个条目上传到微生信平台(http://bioinformatics.com.cn/)，对数据进行可视化；选取KEGG信号通路中最为显著的20条信号通路与绘制气泡图对数据进行可视化；对最显著的20条KEGG信号通路其靶点绘制通路–靶点网络图。

2.8. 分子对接验证

以核心有效成分作为配体，从TCMSP数据库下载其mol2格式文件；核心基因靶点作为受体，从PDB数据库(https://www.rcsb.org/)下载核心靶点蛋白的晶体结构(PDB格式)，其中蛋白晶体结构筛选原则如下：① 为人源蛋白；② 优先选择带有原小分子配体的晶体复合物；③ 优先选择分辨率高的结构；④ 优先选择X-晶体衍射方法得到的结构。使用PyMOL2.2.0软件对核心靶点蛋白进行去除水分子和原始配体，利用AutoDock软件将核心靶点进行加氢后设置为受体，并保存pdbqt格式文件；对有效成分小分子经去除水分子、计算Gasteiger电荷后设置为配体，并保存为pdbqt格式文件；将受体、配体进行半柔性对接，保存对接结果的结合能，并对结合能最强的5组分子对接结果用PyMOL软件进行可视化。

3. 结果

3.1. 乌梅丸的有效成分及作用靶点基因的获取

通过TCMSP数据库检索乌梅丸的有效成分，其中乌梅40个、细辛192个、桂枝220个、黄连48个、黄柏140个、当归125个、人参190个、花椒101个、干姜148个、附子65个，初筛到1269个有效成分。以OB ≥ 30%，DL ≥ 0.18为标准复筛及去除重复值选后共得到102个成分，删除无作用靶点的成分后最终得到有效成分为67个，其中共有有效成分14个，包括槲皮素、山奈酚、广玉兰内酯、谷甾醇、黄连素、黄连碱等。并通过“Related Targets”模块获取乌梅丸有效成分的作用靶点共1953个，通过Uniprot数据库标准化处理、去除重复值后最终获得205个有效成分的作用靶点。

3.2. IBS-D靶点基因的获取

在DisGeNET数据库、GeneCards数据库、DrugBank数据库、NCBI Gene数据库检索获取IBS-D的基因靶点，经标准化处理后得到疾病靶点基因共2327个。

3.3. 药物靶点及疾病靶点的交集获取

将步骤2.1及步骤2.2中获得的乌梅丸的作用靶点和疾病的基因靶点通过Venny2.1在线网站进行取交集(如图1)，获得两者交集靶点基因148个。

Figure 1. Intersection of drug and disease targets

图1. 药物、疾病靶点交集图

3.4. 构建乌梅丸治疗IBS-D的PPI网络

将步骤2.3中获得的148个交集靶点基因在String数据库中选取“Multiple proteins”，导入交集靶点基因、物种选为“人类”后进行PPI蛋白互作图的绘制。设置蛋白相互作用分值为0.400后获得一个148个节点、2592条边、平均节点连接度(degree)值为35的PPI蛋白互作图，并下载该网络图的PNG格式图片文件(如图2)及TSV格式文本文件。

Figure 2. PPI protein mapping

图2. PPI蛋白互作图

Figure 3. Screening of core targets

图3. 核心靶点的筛选

3.5. IBS-D核心靶点基因的获取

将步骤2.4中下载的TSV文件导入CytoScape 3.7.1软件，通过内置软件Network Analyzer对网络进行拓扑参数分析，得到网络的BC为0.006052076、CC为0.544729963、degree值为35.26530612。根据节点degree值设置节点大小由小到大，节点颜色由暗变亮，根据综合得分(combined score)值设置连接线由细至粗对网络图进行处理。通过设置筛选条件：BC ≥ 0.006、CC ≥ 0.545、Degree ≥ 35筛选核心基因靶点，如图3。以degree值由大到小筛选网络图中疾病节点，可发现AKT1、IL6、VEGFA、JUN、IL1B、CASP3、EGFR、HIF1A、PTGS2、ESR1等靶点度值较大，可能是乌梅丸治疗IBS的核心基因靶点，在整个网络中起到枢纽的作用，见表1。

Table 1. Core target information

表1. 核心靶点信息

3.6. 绘制“药物–活性成分–靶点”网络图及药物核心活性成分的获取

使用Cytoscape3.7.1软件进行“药物–活性成分–靶点”网络图的绘制，如图4。该网络有265个节点，其中10个药物节点、92个药物活性成分节点、14个共同活性成分节点、1个疾病节点，148个基因节点，1423条边。通过Network Analyzer得到每个活性成分节点平均与13.87个疾病靶点基因节点所连接，每个疾病靶点节点平均与8.73个活性成分节点所连接，这也体现了中药多成分与疾病多靶点共同作用的整体性和联系性。依据节点degree值选取值排名前10的药物有效成分，如表2。

Figure 4. Network diagram of “drugs-active ingredients-targets” (Note: the left hexagonal purple nodes are 10 drugs of Wumei Pill, the colored square nodes are active ingredients of drugs, the red round nodes are common ingredients of drugs, and the right lilac rectangular nodes are common target genes of drugs and diseases)

图4. “药物–活性成分–靶点”网络图(注：左侧六边形紫色节点为乌梅丸10种药物，彩色方形节点为药物有效成分，红色圆形节点为药物共有成分，右侧淡紫色矩形节点为药物、疾病共有靶点基因)

Table 2. Top 10 active ingredients of drugs with DC value

表2. DC值排名前10的药物有效成分

3.7. GO功能和KEGG信号通路富集分析

将乌梅丸治疗IBS的作用靶点导入Metascape数据库，物种设置为人类，选择“CustomAnalysis”分别进行GO功能和KEGG信号通路富集分析。GO功能富集分析中BP分析获得1583个条目，前3条为response to inorganic substance (对无机物的反应)、response to hormone (对激素的反应) response to xenobiotic stimulus (对异生物质刺激的反应)；CC分析获得89个条目，前3条为mmembrane raft (膜筏)、transcription regulator complex (转录调节因子复合物)、vesicle lumen (囊泡腔)；MF分析获得171个条目，前3条为：protein homodimerization activity (蛋白质同二聚化活性)、DNA-binding transcription factor binding(DNA结合转录因子结合)、oxidoreductase activity (氧化还原酶活性)。根据−log10(P)值选取BP、CC、MF中值最大的10个条目上传到微生信平台绘制富集分析图对数据进行可视化，如图5。KEGG信号通路富集分析共获得195条信号通路，前3条为Pathways in cancer (癌症通路)、Lipid and atherosclerosis (脂质与动脉粥样硬化)、AGE-RAGE signaling pathway in diabetic complications (糖尿病并发症中的AGE-RAGE信号通路)，根据−log10(P)值选取KEGG信号通路中值最大的20条信号通路与其靶点基因导入Cytoscape3.7.1软件中，绘制得到通路–靶点网络图，见图6；同时上传到微生信平台绘制气泡图对数据进行可视化，见图7。

3.8. 分子对接验证

将步骤2.6中“药物–活性成分–靶点”网络图中核心活性成分(槲皮素、山奈酚、β-谷甾醇、豆甾醇、异紫堇杷明碱、四氢小檗碱、R-氢化小檗碱、芝麻素、卡文定碱、隐蒎酮)作为配体，通过PDB数据库下载步骤2.5所得到的10个核心蛋白(AKT1、IL-6、VEGFA、JUN、IL-1β、CASP3、EGFR、HIF-1α、PTGS2、ESR1)的三维结构(PDB格式)，将处理后的蛋白质受体与有效成分配体进行对接，并记录每一次对接的结合能，见表3，并通过热图对结果进行可视化，见图8。一般认为，结合能小于−4.25 kcal/mol、−5.0 kcal/mol或−7.0 kcal/mol分别表明配体与受体之间具有一定、良好或强的结合活性。结合能越低，受体与配体的亲和力越高，构象越稳定 [7]。输出与核心蛋白结合能最优的5组分子对接结果用PyMOL软件进行可视化，输出三维图，如图9。

Figure 5. Enrichment diagram of BP, CC and MF pathways

图5. BP、CC、MF通路富集图

Figure 6. Pathway-target network diagram (Note: Yellow node is KEGG pathway name, and green node is gene target)

图6. 通路–靶点网络图(注：黄色节点为KEGG通路名称，绿色节点为基因靶点)

4. 讨论

中医经方乌梅丸的记载首见于《伤寒论》：“厥阴之为病，消渴，气上撞心，心中疼热，饥而不欲食，食则吐蛔，下之利不止，乌梅丸主之。”乌梅丸由乌梅、细辛、干姜、黄连、当归、炮附子、蜀椒、桂枝、人参、黄柏十味药组成。全方具有辛开苦降，寒热并用、攻补兼施的配伍特点，主要功效为祛寒温脏，养血通脉，调和阴阳。袁方 [3] 使用加减乌梅丸治疗IBS-D，疗效满意；倪树文 [4] 等使用乌梅丸治疗寒热错杂型IBS-D取得确切疗效，并有安全、无副作用的特点。对于寒热错杂型IBS-D，2017年中医共识 [8] 也推荐使用乌梅丸作为主方治疗。一项Meta分析 [9] 指出，加减乌梅丸治疗IBS-D的临床疗效优于常规西药治疗，且具有复发率低，不良反应较少的特点，尤以在改善腹痛、腹泻症状方面较明显。

Figure 7. Enrichment diagram of Kegg pathway (Note: The circular dot size indicates the number of enrichment genes. The circular dot size larger, the number of genes increase. The color indicates the significance of enrichment. The more significant enrichment, the color to be redder.)

图7. KEGG通路富集图(注：圆点大小表示富集的基因数目，圆点越大表示富集基因越多；颜色代表富集的显著程度，颜色越红富集越显著。)

Table 3. Binding energy of core effective components and core targets

表3. 核心有效成分与核心靶点结合能

Figure 8. Thermal diagram of binding energy

图8. 结合能热图

根据乌梅丸治疗IBS-D网络图，槲皮素、山奈酚、β-谷甾醇、豆甾醇等有效成分成分有着较大的连接节点数，这可能是乌梅丸中的核心有效成分。槲皮素、山奈酚是常见的生物类黄酮，其中槲皮素可调控炎症信号通路，通过抑制炎症因子、介质的表达进而起到镇痛作用 [10] [11] [12]。有实验表明，槲皮素能舒张结肠平滑肌，抑制小鼠正常胃排空及小肠运动亢进作用，这可能是治疗IBS-D的机制 [13]。山奈酚可通过调节炎症相关蛋白表达、抑制转录因子激活等方式显著抑制炎症因子的产生，从而抑制炎症的发生和发展，还具有解痉作用 [14]。β-谷甾醇可通过抑制炎症小体NLRP3的激活使细胞中的肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素1β (IL-1β)、白介素6 (IL-6)生成显著减少，从而起到抗炎作用 [15]，还具有抗菌、抗肿瘤、降脂、抗动脉粥样硬化等多种作用 [16]。豆甾醇具有抗炎作用，研究发现 [17] 豆甾醇能明显抑制降低结肠组织IL-1、IL-6等炎症因子的mRNA表达；还可抑制基质金属蛋白酶(MMPs)的表达而治疗骨关节炎；还有镇痛、抗肿瘤、降低胆固醇、抗糖尿病等多种作用 [18]。根据结合能热图，芝麻素与疾病靶点基因AKT1结合能明显优于其他成分，研究 [19] 发现芝麻素可抑制TNF-α诱导的促炎细胞因子IL-6和IL-1mRNA的表达，具有抗炎作用，但是其对IBS-D的作用机制研究较少，还有待进一步探讨。此外芝麻素还具有抗癌、降血压、降血糖的作用 [20]。

Figure 9. Docking results of 5 groups of molecules with optimal binding energy

图9. 结合能最优的5组分子对接结果

通过String数据库构建乌梅丸治疗IBS-D的PPI网络，根据degree值大小得出乌梅丸与IBS-D相互作用的关键靶点有AKT-1、IL-6、VEGFA、IL-1β、HIF-1α、PTGS2、ESR-1等，体现出乌梅丸治疗IBS-D多靶点的特点。AKT1是蛋白激酶B (AKT)三种亚型之一，有研究 [21] 指出，IBS-D患者血清肥大细胞数量较正常人明显增多，并且肥大细胞数量越多，疼痛阈值越低；而磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B (PI3K/AKT)通路的激活可促进肥大细胞脱颗粒，释放5-羟色胺(5-HT)、组胺、前列腺素等生物活性物质，破坏肠道屏障影响内脏敏感性，或破坏局部微循环的完整性而引发炎症反应 [22] [23] [24]；亦可诱导促炎因子的分泌，使得炎性细胞浸润，最终导致炎症反应，改变肠道动力及肠道敏感度，进而引起腹痛、腹泻症状 [25]。并且AKT参与着多种类型的肿瘤(如胰腺癌、皮肤癌、乳腺癌、结直肠癌、甲状腺癌和非小细胞肺癌)发生 [26]。TNF-α是炎症发生和肿瘤启动的重要因子，能够参与炎症反应并促进机体分泌IL-1、IL-6等促炎细胞因子，损伤粘膜组织 [27] [28]；IL-1β、IL-6作为多功能炎性细胞因子，在多种生物效应中发挥重要作用。研究发现 [29] IBS-D患者IL-1β、IL-6的水平升高，IL-1β、IL-6等炎症因子可促使胃肠道胆碱能神经对乙酰胆碱及其他炎性介质的敏感性增高，这可能是引起IBS-D患者腹痛原因之一；IL-1β可通过抑制肠道钠钾酶的活性而抑制水、钠吸收，这在一定程度上可以解释IBS-D腹泻症状的产生 [30]。丁晓洁等 [31] 通过研究发现乌梅丸可降低大鼠血清IL-6含量，对IBS-D治疗具有显著作用。IL-6和IL-1β又可通过激活AKT1，上调白细胞介素-17 (IL-17)的表达而促进肠道炎症的发生 [32]。研究证实 [33]，IBS患者体内的AKT1表达确实更高此外有报道指出 [34]，IL-6也是感染后肠病(PI-IBS)的独立风险因素。研究发现 [35]，女性IBS患者体内IL-1β、IL-6和TNF-α比男性IBS患者更多，且男女体内雌激素水平异常，这可能是女性IBS患者多于男性的原因，且雌激素能够抑制胃肠平滑肌的收缩，也可降低结肠组织中5-HT水平，抑制IBS的发生发展。VEGF可激活核转录因子(NF-κB)的表达，导致各种促炎因子及趋化因子的产生 [36]。VEGF及其受体VEGFR2可提高血管通透性及促进炎性细胞浸润；VEGF又可将白细胞及细胞粘附分子吸引到感染部位以促进炎症，在炎症性肠病中发挥重要作用 [37] [38]。多份报道指出，HIF-1α与炎症的关系非常密切 [39] [40] [41]，炎症相关因子都能促进HIF-1α的增加，使其发挥炎症级联放大作用，在机体的生理、病理过程中扮演着重要的角色 [42]。CASP3是重要的凋亡信号分子，在肺癌、前列腺癌、胃癌、卵巢癌等癌症的细胞凋亡中发挥重要作用 [43] [44] [45]。c-Jun氨基末端激酶的激活会促进炎症介质编码基因的表达而加重炎症反应 [46]。

GO分析结果表明，乌梅丸治疗IBS-D在生物学过程方面最可能与对无机物、激素、异生物质刺激的反应等有关；细胞组分方面最有可能与膜筏、转录调节因子复合物、囊泡腔等相关；分子功能方面则最可能与蛋白质同二聚化活性、DNA结合转录因子结合、氧化还原酶活性等相关。KEGG通路富集分析结果显示，乌梅丸治疗IBS-D主要涉及癌症通路、脂质与动脉粥样硬化、糖尿病并发症中的AGE-RAGE信号通路等相关信号通路，与前述乌梅丸有效成分的作用及疾病基因靶点的意义相符。

5. 结论

综上，本文通过网络药理学和分子对接技术预测乌梅丸治疗IBS-D的作用机制，发现乌梅丸中槲皮素、山奈酚、β-谷甾醇、豆甾醇等核心药效成分通过作用于AKT1、L-6、IL-1B、VEGFA、EGFR等核心靶点，通过参与炎症、细胞代谢及内分泌等相关反应和通路治疗IBS-D，证明了乌梅丸治疗IBS-D具有多成分、多靶点、多通路的特点，为乌梅丸核心药效成分及其制剂的新型药物治疗IBS-D提供一定的依据。

由于乌梅丸组方的复杂性，且不同数据库资料并非实时更新，以及分子对接技术的不成熟等影响因素，本研究仅对乌梅丸治疗IBS-D的作用机制进行了预测分析，其具体的机制还需进一步通过体内和体外实验来进行进一步验证。

文章引用

朱港星,曹生海,黎 洁,马忠义,张成宇. 基于网络药理学及分子对接预测乌梅丸治疗腹泻型肠易激综合征的作用机制
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    47. NOTES

    作者简介：朱港星(1997-)，男，在读硕士。研究方向：中医消化病方向，E-mail: zgx15690176167@163.com

    *通讯作者：曹生海，(1971-)，男，硕士研究生导师，副主任医师。研究方向：中医消化病方向，E-mail: 1303395548@qq.com

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