青梅是重要的山区特色水果,青梅精是一种传统的加工食品,据报道有杀菌、抑制肿瘤等作用。本文研究了青梅精对乳腺癌细胞MCF-7和肝癌细胞HepG2的抑制作用,结果显示:青梅精各剂量组都能不同程度的抑制乳腺癌细胞MCF-7和肝癌HepG2细胞的增殖,且呈现明显剂量–效应关系。青梅精浓度5 mg∙mL−1对乳腺癌MCF-7细胞和肝癌HepG2细胞抑制率分别达82.18%和81.22%。<br/>Plum is an important characteristic fruit in mountainous area. Plum essence is a traditional processed food. It has been reported that it can kill bacteria and inhibit tumors. In this paper, the inhibitory effect of plum essence on breast cancer cell MCF-7 and hepatoma cell HepG2 was studied. The results showed that plum essence can inhibit the growth of breast cancer cell line MCF-7 and HepG2. The proliferation of breast cancer cells MCF-7 and HepG2 cells was inhibited to varying degrees in all dosage groups, and the dose-effect relationship was obvious. The inhibitory rates of 5 mg∙mL−1 to breast cancer MCF-7 cells and hepatoma HepG2 cells were 82.18% and 81.22%, respectively.
梁多,刘智均
广东科贸职业学院,广东 广州
收稿日期:2019年1月26日;录用日期:2019年2月8日;发布日期:2019年2月15日
青梅是重要的山区特色水果,青梅精是一种传统的加工食品,据报道有杀菌、抑制肿瘤等作用。本文研究了青梅精对乳腺癌细胞MCF-7和肝癌细胞HepG2的抑制作用,结果显示:青梅精各剂量组都能不同程度的抑制乳腺癌细胞MCF-7和肝癌HepG2细胞的增殖,且呈现明显剂量–效应关系。青梅精浓度5 mg∙mL−1对乳腺癌MCF-7细胞和肝癌HepG2细胞抑制率分别达82.18%和81.22%。
关键词 :青梅精,乳腺癌细胞,肝癌细胞
Copyright © 2019 by author(s) and Hans Publishers Inc.
This work is licensed under the Creative Commons Attribution International License (CC BY).
http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/
青梅又称酸梅、果梅,为蔷薇科杏属乔木果实,原产于我国,栽培历史在3000年以上 [
乳腺癌是严重威胁女性健康与生命的恶性肿瘤之一,其死亡率为欠发达国家地区女性恶性肿瘤致死的首位 [
因此本文研究青梅浓缩加工产品青梅精对乳腺癌细胞和肝癌细胞的抑制作用,为进一步抗肿瘤产品的开发提供依据。
青梅:白粉梅,产自广东陆河。
人乳腺癌细胞(MCF-7)、人肝癌细胞(HepG2)购自美国American Type Culture Collection公司,人正常肝细胞(LO2)购自中山大学医学院。
试剂:高糖DMEM培养基,胎牛血清(FBS),胰蛋白酶,PBS磷酸缓冲液购于美国Gibco公司,四氮唑蓝(MTT),二甲基亚砜(DMSO)购自美国Sigma公司。其他试剂均为分析纯,购于国药集团化学试剂有限公司。
CO2细胞培养箱,美国Thermo公司;生物安全柜(新加坡Esco公司);Varioskan Flash酶标仪,美国Thermo公司。
青梅精的加工包括以下步骤:1) 将青梅清洗干净、预煮、去核、榨汁,得到青梅果浆;2) 对青梅果浆进行灭菌处理,装灌密封,常温储存1~2年;3) 青梅果浆倒入保温夹层锅内,加热至沸腾,沸腾回流8~10 h,停止加热,保温8~10 h;4) 再次将青梅果浆加热至沸腾,常压浓缩,过滤除去青梅果浆中的果肉纤维,滤液置于保温材料中保温8~10 h;5) 将步骤4)中的滤液加热至沸腾,常压浓缩,得到青梅精 [
1) 细胞系及传代培养
所有细胞均培养于含10%胎牛血清(FBS)和100 U/mL青霉素和100 U/mL链霉素的高糖型DMEM正常培养基中,并置于37℃、5% CO2的细胞培养箱中培养,隔天换一次培养基。待细胞密度长至约瓶壁80%,用0.25%胰蛋白酶消化,按照1:3比例传代。
2) 青梅精对细胞存活率的影响实验
青梅精对细胞存活率的影响采用MTT法测定,将细胞配成浓度为5 × 104个/mL的细胞悬液,反复吹打均匀后接种于96孔细胞培养板上,每孔100 μL。置于37℃、5% CO2培养箱中培养使细胞重新贴壁。24 h后,弃去培养基,实验组加入不同浓度(5.00 mg/mL,2.50 mg/mL,1.25 mg/mL,0.625 mg/mL DMEM 正常培养基配制)的青梅精溶液100 μL,对照组分别加入100 μL DMEM正常培养基,每组设3个平行孔。在CO2培养箱中继续培养。48 h后,向每个细胞培养孔加入20 μL MTT溶液(5 mg/mL,PBS配制),轻轻混匀后置于37℃、5% CO2培养箱中继续培养4 h。弃去每个孔中的MTT培养液,加入100 μL DMSO,37℃震荡10 min后,将生成的甲臜溶液置于酶标仪中在570 nm处测定其OD值。另设空白调零组,调零孔不接种细胞,其余操作同空白对照组。设实验组的OD值为A,对照组OD值为B,调零组OD值为C。细胞存活率的计算公式如下:
细 胞 存 活 率 ( % ) = ( A − C ) / ( B − C ) × 100 %
所有实验重复3次以上,实验结果用平均值 ± 标准差(mean ± SD)表示。采用美国IBM公司开发的 SPSS19.0软件进行单因素方差分析(one-way ANOVA)。显著性水平P < 0.05为差异显著,P < 0.01为差异极显著。
实验结果如表1显示,0.625~5.00 mg∙mL−1青梅精处理48 hr对乳腺癌MCF-7细胞有明显的抑制作用,随着药物浓度的增加,抑制作用逐渐增强,显示出一定的量效关系。其中青梅精浓度5.00 mg∙mL−1对乳腺癌细胞抑制率达(82.18 ± 4.9)%,差异具有统计学意义(P < 0.05)。
组别 | 抑制率/% |
---|---|
空白对照 | 0 ± 0.10 |
0.625 mg∙mL−1 | 20.20 ± 0.28** |
1.25 mg∙mL−1 | 36.15 ± 0.90** |
2.50 mg∙mL−1 | 65.67 ± 2.1** |
5.00 mg∙mL−1 | 82.18 ± 4.9** |
表1. 青梅精对乳腺癌MCF-7细胞增殖的影响( X ¯ ± s , n = 3)
注:与空白对照组比较,**P < 0.01。
实验结果如表2所示,0.625~5.00 mg∙mL−1青梅精处理48 hr对肝癌HepG2细胞有明显的抑制作用,随着药物浓度的增加,抑制作用逐渐增强,显示出一定的量效关系。其中青梅精浓度5.00 mg∙mL−1对肝癌细胞抑制率达(81.22 ± 6.7)%,差异具有统计学意义(P < 0.05)。
组别 | 抑制率/% |
---|---|
空白对照 | 0 ± 0.11 |
0.625 mg∙mL−1 | 15.15 ± 0.39** |
1.25 mg∙mL−1 | 30.37 ± 0.97** |
2.50 mg∙mL−1 | 60.60 ± 3.6** |
5.00 mg∙mL−1 | 81.22 ± 6.7** |
表2. 青梅精对肝癌HepG2细胞增殖的影响( X ¯ ± s , n = 3)
注:与空白对照组比较,**P < 0.01。
与空白对照组比较,青梅精各剂量组都能不同程度的抑制乳腺癌细胞MCF-7和肝癌HepG2细胞的增殖,且呈现明显剂量–效应关系,该结果与Nakagawa [
广东省科技项目(2014A070713002, 2014A040402001)。
梁 多,刘智均. 青梅精对乳腺癌、肝癌细胞增殖抑制率的研究Research on Inhibition Rate of Plum Essence to the Proliferation of Breast Cancer Cells MCF-7 and Liver Cancer Cells HepG2[J]. 食品与营养科学, 2019, 08(01): 75-79. https://doi.org/10.12677/HJFNS.2019.81010