沈阳航空航天大学理学院，辽宁 沈阳

收稿日期：2023年9月15日；录用日期：2023年10月18日；发布日期：2023年10月25日

摘要

针对“枸杞泡水”这一养生话题，对“枸杞泡水”的最佳饮用条件、枸杞泡水前后总黄酮含量变化、氧化变质枸杞中总黄酮含量变化进行研究。实验表明：在液料比为1:15，温度60℃，频率40 kHz，功率100 W，90%的乙醇溶液中，超声时间为40 min的提取条件下，测得总黄酮的含量为0.26 mg/g。“枸杞泡水”最佳水温60℃，时间40 min最宜。在最佳泡水条件下，枸杞水中总黄酮含量仅为果肉中的17%，建议“枸杞泡水”时也要直接食用果肉。

关键词

枸杞，总黄酮，紫外分光光度计

Determination of the Content of Flavonoids of Lycium barbarum before and after Soaking in Water

Xin Sui, Zhehua Zhang, Shiyu Shang, Hongkun Jiang, Xiaoyun Sun^*

College of Science, Shenyang Aerospace University, Shenyang Liaoning

Received: Sep. 15^th, 2023; accepted: Oct. 18^th, 2023; published: Oct. 25^th, 2023

ABSTRACT

With regard to the topic of “Lycium barbarum soaked in water”, a study was conducted to investigate the optimal conditions for consuming soaked Lycium barbarum, changes in total flavonoid content before and after soaking, and changes in total flavonoid content in oxidized Lycium barbarum. The experiment indicated that under the extraction conditions of a liquid-to-material ratio of 1:15, a temperature of 60˚C, a frequency of 40 kHz, a power of 100 W, and a 90% ethanol solution, with an ultrasound time of 40 minutes, the total flavonoid content was measured to be 0.26 mg/g. The best conditions for soaking Lycium barbarum were found to be a water temperature of 60°C and a duration of 40 minutes. Under these optimal soaking conditions, the total flavonoid content in Lycium barbarum water was only 17% of that in the fruit pulp. It is recommended to consume the fruit pulp directly when soaking Lycium barbarum.

Keywords:Lycium barbarum, Flavonoids, Ultraviolet Spectrophotometer

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1. 引言

枸杞(Lycium chinense Miller)是我国传统的药食同源物种，属茄科植物，广泛分布在我国半干旱和干旱地区，资源丰富 [1] 。枸杞属于现在比较流行的一种保健食材，“枸杞泡水”已然成为养生的代名词。主要因为枸杞中含有多糖、维生素、氨基酸、黄酮及环肽类等有效成分，还有人体必需的微量元素锰、锌、铁和硒等 [2] 。其中，黄酮类化合物作为一种功效成分，具有多种有益的生理功能和药理作用，对心脑血管疾病、降血脂等疾病均有显著疗效 [3] [4] [5] [6] 。

黄酮类化合物除了对清除自由基、抗氧化、抗菌、抗病毒和调节免疫等方面具有显著的药效外，还在抑制肿瘤细胞生长、抗炎保肝 [7] [8] 、抗抑郁 [9] 、抗衰益寿等方面表现出良好的作用。宁夏大学的牛银红 [10] 利用H₂O₂诱导的HUVEC氧化损伤模型，评价总黄酮对HUVEC氧化应激损伤的，具有明显的抗衰效果；以线虫转移至不同受试物处理的NGM培养基，进行实验发现总黄酮能够延长线虫的寿命15%。另外，古丽巴哈尔·卡吾力 [11] 等研究发现，黑果枸杞中总黄酮对羟自由基、超氧阴离子自由基和DPPH的清除率分别为46.14%、59.32%和72.68%。

随着社会压力日益增大，免疫力低下，抑郁症的人群越来越多，如果通过“枸杞泡水”这一简单的食用途径，就能有效地增加自身免疫力，减少抑郁症的风险，对于人们健康生活是有很好的现实意义。本课题使用了操作简单，提取时间短的超声提取法 [10] ，提取枸杞中的总黄酮。对“枸杞泡水”的最佳饮用条件、枸杞泡水前后总黄酮含量变化、氧化变质枸杞中总黄酮含量变化进行研究，均得出准确的实验数据。有了研究中实验数据的指导，能够更好地帮助我们在有效食用枸杞。在养生健康方面该实验显示出很好的现实指导意义。

2. 实验部分

2.1. 仪器与试剂

紫外分光光度仪(尤尼科2100)、离心机、分析天平、枸杞(宁夏)，硝酸铝、亚硝酸钠、氢氧化钠、芦丁(分析纯)、乙醇(95%)、超纯水，以上药品均购自国药。

2.2. 总黄酮的测定

2.2.1. 芦丁标准曲线

0.10 g/L的芦丁标准溶液：0.01 g芦丁置于100 mL容量瓶中，用60%乙醇超声溶解定容。精确移取0.10 g/L的芦丁标准溶液5.0 mL、10.0 mL、15.0 mL、20.0 mL、25.0 mL分别置于50 mL容量瓶中，用60%乙醇稀释至约25 mL，然后依Al(NO₃)₃-NaNO₂-NaOH显色法，依次加5%亚硝酸钠溶液1.50 mL，10%硝酸铝溶液1.50 mL，40.00 g/L氢氧化钠溶液20.00 mL，60%乙醇定容至刻度。以未加标准品的显色试剂乙醇溶液作为空白，以吸收度为纵坐标，浓度为横坐标，紫外分光光度计在495 nm处测定吸光度，绘制标准曲线。得到回归方程y = 0.017x，x为质量浓度(mg/mL)，y为吸光度，r² = 0.9724，线性关系良好。

2.2.2. 枸杞的预处理

取枸杞洗净烘干，粉碎机粉碎成粉末备用。

2.2.3. 超声时间对总黄酮含量的影响

准确称取8份枸杞粉末，每份5 g，放入烧杯中，按液料比1:15，加入90%乙醇。把该烧杯放入温度为60℃，频率40 kHz，功率100 W的超声波仪中超声。分别在时间为20 min、30 min、40 min、50 min、60 min、70 min、80 min、90 min吸取5 mL提取液放入高速离心(5000 r/min)中离心10 min，备用测定，确定最佳提取时间。

2.2.4. 枸杞中总黄酮含量测定

采用NaNO₂-Al(NO₃)₃显色法测定提取液中枸杞总黄酮的含量 [12] 。准确量取2 mL提取液移至25 mL容量瓶中，按照NaNO₂-Al(NO₃)₃比色法进行操作，以同浓度乙醇定容，紫外分光光度计测定其在495 nm处的吸光度，根据线性回归方程计算总黄酮浓度，分别对枸杞果实中、枸杞果粒和枸杞粉末进行泡水的“枸杞水”中总黄酮的含量进行测定。

2.2.5.“枸杞泡水”时，不同浸泡温度测定枸杞水中总黄酮含量

准确称取5份枸杞粉末，每份5 g，放入烧杯中，按液料比1:15，加入90%乙醇。把该烧杯放入频率40 kHz，功率100 W的超声波仪中超声20 min，设定浸泡温度为40℃、50℃、60℃、70℃、80℃，分别吸取5 mL提取液放入高速离心(5000 r/min)中离心10 min，备用测定，确定最佳浸泡温度。

3. 结果与分析

3.1. 超声时间对提取效果的影响

表1. 时间对提取效果的影响

由表1可知，随超声时间的增加，吸光度值先增后降，之后保持平稳，当超声时间为40 min时总黄酮含达到最大，确定超声提取总黄酮的最佳提取时间为40 min。观察超声液发现，随时间增长，溶液粘稠度增加，不利于提取。按该实验结果可知，在最佳提取条件下，测得枸杞中总黄酮含量为0.26 mg/g。

3.2. 不同浸泡温度的枸杞水中总黄酮含量测定

分别选用枸杞颗粒和枸杞粉末两种形态果实，在不同温度下进行枸杞泡水实验，实验结果见图1。

图1. 枸杞水中总黄酮含量测定结果

由图1可知，使用不同温度浸泡枸杞，测得枸杞水中总黄酮含量，结果表明无论是采用枸杞颗粒还是枸杞粉末泡水，枸杞水中总黄酮的含量都呈现先增加后减少的趋势，水温在60℃时，枸杞水中总黄酮的含量最高。相对而言，枸杞粉泡水效果要优于枸杞颗粒的泡水效果。使用粉末泡水的枸杞水中总黄酮的含量占枸杞总黄酮的17%，使用枸杞颗粒泡水的枸杞水中总黄酮的含量占总含量的8.9%，很明显枸杞水中总黄酮的含量很少。所以想要达到最佳养生效果，在喝枸杞水的时候果肉也要一起食用。

3.3. 过期枸杞中总黄酮含量测定

枸杞放置一段时间，尤其是密封性不好的时候就会发生氧化变质现象，我们选择了放置在空气中3个月氧化变黑的枸杞进行测定，测定方法同上，得到的实验结果见表2。

表2. 变质枸杞总黄酮含量测定结果

由表2的实验数据表明，氧化后的枸杞中总黄酮含量明显降低，含量仅为好果的5.3%，已经失去其营养价值，完全可以抛弃。

4. 结果与讨论

现在人们的寿命逐渐延长，但是因为环境、生活压力、各种疾病等内外在因素的影响，人们无论在精神上还是身体上总会处在一种亚健康状态，寻求一种简单友好的养生方式，提高我们的身体素质，是我们追求的目标。

枸杞作为一种药用和保健食品，长期服用枸杞，对抗氧化、抗衰老、降血糖、降血脂，提高记忆力都有着明显的治疗效果明显 [13] 。我们通过实验给出非常准确直观的数据。表明枸杞中的确含有丰富的总黄酮，在液料比为1:15，温度60℃，频率40 kHz，功率100 W，90%的乙醇溶液中，超声时间为40 min的提取条件下，测得总黄酮的含量为0.26 mg/g。在水温60℃，浸泡时间40 min最宜，水中总黄酮含量最高。枸杞粉末泡水的枸杞水中总黄酮的含量占枸杞总黄酮的17%，枸杞颗粒泡水的枸杞水中总黄酮的含量占果实总黄酮含量的8.9%，想要达到最佳养生效果，在喝枸杞水的时候还是要食用枸杞。暴露在空气中氧化的枸杞营养成分严重丢失，其中总黄酮的含量明显减少，总黄酮含量仅为健康果实的5%。表明氧化过期的枸杞中的营养成分几乎全部丢失，完全可以丢弃。所以“枸杞泡水”的确是一种非常友好简单的养生方式，但是要达到最佳养生效果，关键是要直接食用浸泡的枸杞。

文章引用

隋鑫,张哲华,商诗语,姜虹坤,孙晓云. 枸杞泡水前后总黄酮含量的测定
Determination of the Content of Flavonoids of Lycium barbarum before and after Soaking in Water[J]. 食品与营养科学, 2023, 12(04): 271-275. https://doi.org/10.12677/HJFNS.2023.124033

参考文献