Open Journal of Fisheries Research
Vol. 05  No. 03 ( 2018 ), Article ID: 26906 , 10 pages
10.12677/OJFR.2018.53015

Histopathological Observation of Hemorrhagic Disease in Schizopygopsis younghusbandi

Wangjiu Danzeng*, Shaoqin Lin

Tibet Autonomous Region Animal Husbandry Station, Lasa Tibet

Received: Sep. 1st, 2018; accepted: Sep. 14th, 2018; published: Sep. 21st, 2018

ABSTRACT

The liver, spleen, kidney, stomach, intestine, and brain of Schizopygopsis younghusbandi with hemorrhagic disease were observed using histopathological methods. The results showed that most of the diseased fish have liver tissue necrosis, very disordered liver cell arrangement, relatively loss cytoplasm, some nuclei rupture, pyknosis and dissolution of the nucleus, scattered hemorrhage and liquefaction erosion in the cells, congestion in the central hepatic vein with fully dissolved red blood cells. The hepatic ducts were detached from the surrounding tissues and were in a free state. The hepatic epithelial cells were abnormal and atrophic, they were arranged loosely, and the gaps were clear. It is also found with impaired kidney structure, degeneration of renal tubules, necrosis and disintegration of epithelial cells, enlargement of gaps in glomerular sac, blurring of glomerular epithelial cells, condensation or rupture of nucleus, severe hemolysis, brown-yellow blood-borne pigmentation mucosal necrosis which shed into pieces. Furthermore, there was intrinsic membrane capillary telangiectasia, at the same time there was a large number of neutrophils and macrophage infiltration with submucosa edema, which resulted in loose tissue structure and thickening. In some diseased fish, muscle fibers in the intestinal tissue are disordered and distorted into vacuoles. The muscle ulcer tissues were non-proliferative inflammation, with epidermal necrosis causing ulceration. The necrosis of muscle cells was marked with swelling and rupture of muscle fibers, lumps of homogenous degeneration also appeared with massive inflammatory cell infiltration. In addition, there was subcutaneous and edema of muscle tissue and infiltration of inflammatory cells. In severe cases, even rupture, dissolution, and necrosis have occurred with myofibrils and disappearance of horizontal stripes, some cells completely dissolved and disappeared, leaving only the outline of the tissue.

Keywords:Schizopygopsis younghusbandi, Hemorrhagic Disease, Pathology

拉萨裸裂尻鱼出血病组织病理观察

旦增旺久,林少卿

西藏自治区畜牧总站,西藏 拉萨

收稿日期:2018年9月1日;录用日期:2018年9月14日;发布日期:2018年9月21日

摘 要

应用组织病理学方法,对患出血病的拉萨裸裂尻鱼的肝脏、脾脏、肾脏、胃、肠道、脑进行观察。结果显示病鱼肝组织大部分坏死,肝细胞排列非常紊乱,细胞质比较疏松,一些细胞核破裂,细胞核固缩、溶解,细胞呈现散布性溢血和液化糜烂,肝中央静脉淤血,内充满溶解的血红细胞;肝管脱离周边组织,呈游离状态,肝管上皮细胞异常、细胞萎缩、排列疏松,空隙较明。肾脏结构受损,肾小管退化,上皮细胞坏死、崩解,肾小球囊腔间隙增大,肾小球上皮细胞模糊,核浓缩或破裂,溶血严重,有棕黄色的血源性色素沉肠黏膜坏死,成片脱落,肠腔内出血,其中充满变性、脱落、坏死解体的细胞碎片,固有膜毛细血管扩张淤血,同时有大量中性白细胞、巨噬细胞浸润,粘膜下层水肿,组织结构疏松,变厚,部分病鱼的肠组织肌层中肌纤维紊乱、扭曲成空泡。肌肉溃疡组织为非增生性炎症,表皮坏死,形成溃疡,肌肉细胞坏死,肌纤维明显肿胀断裂,出现团块状均质化变性,大量炎细胞浸润;溃疡部皮下及肌肉组织水肿及炎细胞浸润;严重者甚至出现断裂、溶解、坏死,肌原纤维和横纹消失,部分细胞完全溶解消失,仅剩下组织轮廓。

关键词 :拉萨裸裂尻鱼,出血病,病理

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1. 引言

拉萨裸裂尻鱼(Schizopygopsis younghusbandi Regan)属于裂腹鱼类(Schizo horacinae fishes)隶属鲤形目(Cypriniforme),鲤科(Cyprinidae),裂腹鱼亚科(Schi zothoracinae),是西藏地区主要的经济鱼类。近几年随着西藏经济的发展,人们的生活水平提高,旅游人口数量的逐渐增多对水产品(鱼类)需求量急剧增加导致过度捕捞现象越来越严重,水电建设工程,生活污水和垃圾排放等活动的影响,使得鱼类栖息环境不断恶化 [1] ,越来越多的疾病给鱼类生存造成了巨大的威胁,其较为严重的疾病就是细菌性疾病,2011年西藏林芝地区雅江米林江段、西藏土著鱼类繁殖场出现西藏裂腹鱼大规模感染疾病,主要表现为腹部充血微膨大,肝脏出血,肠粘膜充血甚至出血这些典型的症状与其他地区淡水鱼类细菌性败血症发病症状大致相同,且该病可引起西藏裂腹鱼类较高的发病率和死亡率,西藏裂腹鱼类本身就繁殖率低,生长发育缓慢,种群脆弱,其种质资源一旦遭到破坏就很难恢复,加上鱼类疾病的爆发,这无疑是对西藏土著鱼类的生存带来严重的危害,因此值得高度重视。以往在西藏地区的鱼类出现此病并且进一步的研究尚为首次。可见该病是西藏裂腹鱼类的一种新的疾病,本试验对出血病拉萨裸裂尻鱼的主要病灶组织肝脏、肾脏、肠道和肌肉等进行了病理组织切片观察,从而为西藏裂腹鱼类出血病的临床诊断和防治提供一定的理论依据。

2. 试验材料与方法

2.1. 实验用鱼

患病和健康拉萨裸裂尻鱼均从西藏土著鱼类繁殖场(来源于雅鲁藏布江曲水江段),体长12~30 cm,体重56~512.3 g,具有典型出血症状的裂腹鱼作为病理学研究材料。健康裂腹鱼通过感官判定、内环境和血液生化指标判定,确认无病后使用。

2.2. 试验方法

2.2.1. 解剖观察

具有典型出血症状濒死的裂腹鱼活体解剖,观察患病鱼体表与内脏组织病变情况,并对症状明显的死亡鱼进行剖检,观察其眼观的病理变化;分别采取患病鱼的肝、肾、脾、胃肠道等组织,波恩氏液(Bouins)固定 [2] ,石蜡包埋切片,H.E染色,中性树胶封片 [3] ,Pro-MicorscanDP300显微镜观察并照相。

2.2.2. 仪器信息

3. 结果

3.1. 病理解剖特征

通过体检,发现病鱼精神萎靡,已完全停止游动,鱼体轻微变黑,离群独游,活动缓慢,鱼体漂浮于水面,其上下颌、口腔、鳃盖、体表两侧、腹部及鳍基均充血发红,肛门红肿突出( 图版1-1 , 2 )。体表背鳍部位皮肤溃疡,时间越长,溃疡灶越大,露出肌肉,甚至糜烂( 图版1-3 );所有鳍条基部均充血,部分病鱼眼睛充血突出,鳃丝略发红呈淤血症状。

对鱼体进行解剖发现,肝脏病变最严重色深,质地较韧( 图版1-4 ),出血肿大、胆肿大、胆汁呈淡黄色,肾肿大出血( 图版1-5 ),鱼鳔出血,肠壁充血,肠内充满大量淡黄色或淡红色腹水并积有大量粘液,部分病鱼还出现肠道胀气症状。与健康西藏裂腹鱼比较,患病西藏裂腹鱼的肝、肾脏、肌肉、肠表现出显著的组织病理变化,鳃、眼病理变化也较明显。

3.2. 病理切片观察

3.2.1. 肝组织病变观察

健康拉萨裸裂尻鱼肝组织肝细胞排列紧密,肝细胞呈圆形或椭圆形,结构清晰,细胞核深色细胞质浅色(见 图版2-1 )。患病组织,病鱼肝组织大部分坏死,肝细胞排列非常紊乱,细胞质比较疏松(见 图版2-2 ),一些细胞核破裂,细胞核固缩、溶解,细胞呈现散布性溢血和液化糜烂。肝中央静脉淤血,内充满溶解的血红细;肝管脱离周边组织,呈游离状态,肝管上皮细胞异常,细胞萎缩,排列疏松,空隙较明显(见 图版2-3 )。肝组织间细胞消解,疏离(见 图版2-4 ),窦状隙中大量炎症细胞浸润,肝细胞肿胀,静脉血管壁模糊,血管、肝胆管和肝细胞不易区分,炎性细胞浸润和含铁血黄素沉着(见 图版2-5 )。

3.2.2. 肾组织病变观察

健康西藏裂腹鱼肾脏内肾小球和肾小管排列比较整齐有序,横切面上皮细胞间分界清晰(见 图版2-6 )。病鱼肾脏结构受损,肾小管退化,上皮细胞坏死、崩解(见 图版2-7 )。肾小球囊腔间隙增大,肾小球上皮细胞模糊,核浓缩或破裂。溶血严重,就有棕黄色的含铁血黄素沉着(见 图版2-8 )。

3.2.3. 肠组织病变观察

正常肠的黏膜向肠腔突起褶成皱襞。黏膜层,粘膜下层、环肌层组成。黏膜层由上皮、基膜、固有膜和黏膜肌组成,各层排列有序(见 图版2-9 )。病鱼的肠黏膜坏死,成片脱落,肠腔内出血,其中充满变性、脱落、坏死解体的细胞碎片(见 图版2-10 )。固有膜毛细血管扩张淤血,同时有大量中性白细胞、巨噬细胞浸润,粘膜下层水肿,组织结构疏松,变厚(见 图版2-11 )。部分病鱼的肠组织肌层中肌纤维紊乱、扭曲成空泡(见 图版2-12 )。

3.2.4. 肌肉组织病变观察

从肌肉溃疡组织的病理切片镜检显示,为非增生性炎症,表皮坏死,形成溃疡,肌肉细胞坏死,肌纤维明显肿胀断裂,出现团块状均质化变性,大量炎细胞浸润;溃疡部皮下及肌肉组织水肿及炎细胞浸润(见 图版2-13 , 14 ),严重者甚至出现断裂、溶解、坏死,肌原纤维和横纹消失,部分细胞完全溶解消失,仅剩下组织轮廓(见 图版2-15 )。

4. 讨论

拉萨裸裂尻鱼患出血病后在短期内出现死亡的高峰,病理组织学变化以全身实质性器官肝、肾、胃、肠、鳃出血和组织细胞变性、坏死为主,全身性充血、出血,肝、肾、胃、肠、鳃、肌肉等组织器官均发生不同程度病变,器官结构破坏、功能衰竭而死亡。

感染后病原体体进入血液以及全身各处,病鱼肝组织大部分坏死,肝细胞排列非常紊乱,肝中央静脉淤血,内充满溶解的血红细;可能是由于单胞菌及其产生的毒素(如溶血素、细胞毒素、肠毒素和表层蛋白)随血流进入肝脏后,导致中毒坏死 [3] ,引起肝脏的解毒功能降低,肝组织空泡变性、实质细胞坏死、肝管脱离周边组织,呈游离状态,肝管上皮细胞异常,细胞萎缩,由于长期停食,身体状况严重恶化,反应迟钝,肝实质细胞大面积坏死,肝功能衰竭,最后死亡 [4] 。肾脏肾小管发生了病变,肾小球血管萎缩,变窄,严重区域肾小球坏死,相应血液系统也出现了障碍,血管破裂,红细胞溶血。

肠道是食物消化的主要场所,也是营养物质吸收的主要场所。在实验的切片检查中,可以清楚地看到病鱼的肠黏膜坏死,成片脱落,肠腔内出血,其中充满变性、脱落、坏死解体的细胞碎片。粘膜下层水肿,组织结构疏松,变厚。部分病鱼的肠组织肌层中肌纤维紊乱、扭曲成空泡。这些变化严重影响了肠道的消化和吸收功能,使病鱼摄食能力降低,严重的甚至丧失 [5] 。

肌肉上皮细胞变性坏死、脱落,真皮的结缔组织和肌原纤维出现团块状均质化变性,可能是停留在体表感染部位的病原体则在局部组织引起病变,从而出现充血、出血、水肿、发炎、糜烂和溃疡的外观症状。本文对患有出血病的西藏裂腹鱼的肠、肝、肾、肌肉的组织病理变化的研究结果与陈东香 [6] 等对斑点叉尾鮰细菌性败血症病原的分离、鉴定与病理学观察和汪开毓等 [7] 对嗜水气单胞菌引起的鲤鱼细菌性败血症的组织病理变化的研究结果基本相似。但是本研究中患病鱼的肝脏和肾脏组织病理观察中,观察到具有含铁血黄素沉着,出现这种可能是嗜水气单胞菌在不同鱼类或同一鱼类在不同的状态和环境中引起的症状可能是不同的,其症状可能与病原菌的种类、鱼的种类、机体的机能状况和环境因素有关。

目前西藏鱼类还未实现人工养殖,生存在河流、湖泊等天然水域因而防治此病,尚无切实可行的办法,笔者认为采取生态防治鱼病的方法最适合西藏当地的实际,提倡以预防为主,严格控制传染源,即保护鱼类栖息地,保持生存环境的稳定;合理捕捞,有效的进行天然鱼类种质的保护;控制外来鱼类的再次引入,从而减少病原生物量是最有效的措施。

文章引用

旦增旺久,林少卿. 拉萨裸裂尻鱼出血病组织病理观察
Histopathological Observation of Hemorrhagic Disease in Schizopygopsis younghusbandi[J]. 水产研究, 2018, 05(03): 131-140. https://doi.org/10.12677/OJFR.2018.53015

参考文献

  1. 1. 旦增旺久, 强巴央宗, 刘海平, 等. 西藏裂腹鱼类出血病病原的初步研究[J]. 水生态学杂志, 2012, 33(6): 124-126.

  2. 2. 曹悼, 陈茂生. 组织实验指导[M]. 北京: 北京大学出版社, 1993: 164.

  3. 3. 孟运莲. 现代组织学与细胞学技术[M]. 武汉: 武汉大学出版社, 2004: 68-86.

  4. 4. 杜宗君. 齐口裂腹鱼溃疡病病原分离鉴定及病理学观察[D]: [硕士学位论文]. 雅安: 四川农业大学, 2007.

  5. 5. 李普霖. 动物病理学[M]. 长春: 吉林科技出版社, 1994: 20-24.

  6. 6. 陈东香. 斑点叉尾鮰细菌性败血症病原的分离、鉴定与病理学观察[D]: [硕士学位论文]. 长沙: 湖南农业大学, 2010.

  7. 7. 汪开毓. 鲤鱼细菌性败血症的病理学研究[J]. 四川农业大学学报, 2004, 22(3): 257-262.

图版1 (Plate 1)

注明:1,2. 病鱼头部、鳃盖、口部、下颌、鳍条及其他体表部位不同程度的充血、出血;3,4. 靠近背鳍一侧、腹鳍和臀鳍基部、尾柄部分皮肤肌肉溃烂;5,6,7. 肝脏点状出血肿大、胆肿大、鱼鳔出血、肠壁充血;8. 肠内充满淡红色腹水并积有大量粘液,出现肠道胀气症状。

注明:1,2. 鱼体轻微变黑,其上下颌、口腔、鳃盖、体表两侧、腹部及鳍基均充血发红,肛门红肿突出;3.体表背鳍部位皮肤溃疡,露出肌肉,甚至糜烂;4. 肝脏病变最严重色深,质地较韧、出血肿大、胆肿大;5. 肾肿大出血、淤血。

图版2 (Plate 2)

注明:1. 健康西藏裂腹鱼肝组织(H.E×400);2. 病鱼肝组织大部分坏死,肝细胞排列非常紊乱,细胞质比较疏松(H.E×200);3,4,5. 干细胞细胞核破裂,细胞核固缩、溶解,细胞呈现散布性溢血和液化糜烂,肝细胞肿胀,静脉血管壁模糊,血管、肝胆管和肝细胞不易区分,炎性细胞浸润和血铁黄质沉积(H.E×400);6. 健康西藏裂腹鱼肾组织(H.E×400);7,8. 肾小管退化,上皮细胞坏死、崩解,肾小球囊腔间隙增大,肾小球上皮细胞模糊,核浓缩或破裂;9. 健康西藏裂腹鱼肠组织(H.E×200);10. 病鱼的肠黏膜坏死,成片脱落,坏死解体的细胞碎片(H.E×400);11. 固有膜毛细血管扩张淤血,同时有大量中性白细胞、巨噬细胞浸润,粘膜下层水肿,组织结构疏松,变厚(H.E×400);12. 肠组织肌层中肌纤维紊乱、扭曲成空泡(H.E×400);13. 健康西藏裂腹鱼肌肉组织(H.E×200);14.肌肉细胞坏死,肌纤维明显肿胀断裂,出现团块状均质化变性(H.E×400);15. 肌纤维断裂、溶解、坏死,肌原纤维和横纹消失,部分细胞完全溶解消失,仅剩下组织轮廓(H.E×400)。

NOTES

*通讯作者。

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