 Botanical Research 植物学研究, 2012, 1, 1-7 http://dx.doi.org/10.12677/br.2012.11001 Published Online April 2012 (http://www.hanspub.org/journal/br) Responses of Three Endophyte Fungi Species Isolated from Natural Grass to Abiotic Stresses Maoying Wei, Lijia Yin, Tong Jia, Minjie Zhu, Anzhi Ren, Yubao Gao College of Life Sciences, Nankai University, Tianjin Email: happygirlwmy521@163.com, ybgao@ nankai.edu.cn Received: Feb. 23rd, 2012; revised: Mar. 20th, 2012; accepted: Mar. 21st, 2012 Abstract: Biological and physiological characteristics of three Neotyphodium species, isolated from native grasses, were compared with the model endophyte Neotyphodium coenophialum, isolated from tall fescues, under different temperature, water and salt conditions. Three Neotyphodium species included Neotyphodium gansuense, Neotyphodium sibiricum and Neotyphodium sp., among which N. sp. was isolated from Leymus chinensis while the other two species were isolated from Achanatherum sibiricum. The results showed that the optimal temperature for the four endophytes was 25˚C. The model endophyte N. coenophialum was un- able to grow at 32˚C, but the other endophytes were able to grow at 10˚C - 3 2˚C. Four fungi cou ld not grow when the PEG concentration was 15%. For N. sp., it tended to increase when PEG concentration was 10%, and this situation is similar to N. coenophialum. For N. gansuense and N. sibiricum, the growth was not in- fluenced till the PEG concentration was up to 10%. Under the treatment of NaCl, the biomass of N. sibiricum and N. coenophialum sign ificantly in creased, but th e growth of N. gansuense and N. sp. were significantly re- strained at 0.3 mol/L NaCl. N. sibiricum was unable to grow at 1.5 mol/L NaCl, but N. coenophialum can still grow under 3 mol/L NaCl. As a result, three species of endophytes which were isolated from native grasses can tolerate high temperature than th e model endophyte. Fo r th e ability o f resistan ce to osmotic stress, only N. sp. is similar to the model endophyte and two endophytes from A. sibiricum was significantly lower than model endophyte. For different salt stress, the tolerance of three native species was significantly lower than the model species. Keywords: Neotyphodium; Endophyte; Ph ysiology; Natural Grass; Resistance 天然禾草中三种内生真菌对非生物胁迫耐性的比较研究 魏茂英，尹立佳，贾 彤，朱敏杰，任安芝，高玉葆 南开大学生命科学学院，天津 Email: happygirlwmy521@163.com, ybgao@ nankai.edu.cn 收稿日期：2012 年2月23 日；修回日期：2012 年3月20 日；录用日期：2012 年3月21 日 摘 要：从天然禾草羽茅和羊草中分离获得 3种不同的内生真菌，即 Neotyphodium gansuense 、 Neotyphodium sibiricum和Neotyphodium sp.。在不同的温度、盐分和渗透胁迫条件下比较 3种内生真 菌的生长状况，并以分离自高羊茅中的模式菌株 Neotyphodium coenophialum为对照。结果表明，3种 内生真菌与模式菌株的最适生长温度均为 25℃，但模式菌株 N. coenophialum在32℃时没有生长，而 从天然禾草中分离获得的内生真菌在 10℃~32℃温度范围内均可生长。当 PEG 浓度超过 15%时，3种 内生真菌与模式菌株均不能生长，N. sp.在10%时仍长势良好，与 N. coenophialu m相似，而 N. sibiricum 和N. gansuense在10 % PEG浓度时，生长受到显著抑制。在盐分处理时，N. sp.和N. gansuense在0.3 mol/L 的NaCl 浓度下，生长受到显著抑制；而 N. sibiricum在1.5 mol/L的NaCl 浓度时生长才受到显 著抑制，但耐盐性均不及 N. coenophialum，后者在 3.0 mol/L的NaCl 浓度下还可以生长。总体看来， 从天然禾草中获得的 3种内生真菌与模式菌株相比较，耐高温的能力更强；耐渗透胁迫的能力只有羊 Copyright © 2012 Hanspub 1  天然禾草中三种内生真菌对非生物胁迫耐性的比较研究 Copyright © 2012 Hanspub 2 草中的 N. sp.与模式菌株接近，而羽茅中的两种菌株的耐渗透胁迫能力却显著低于模式菌株；对于不 同的盐浓度胁迫，3种菌株的耐盐性都显著低于模式菌株。不同种类内生真菌在渗透胁迫方面的耐性 与其宿主植物表现相一致。 关键词：Neotyphodium；内生真菌；生理；天然禾草；抗逆性 1. 引言 内生真菌是指其生活史的某一时期生活在植物 组织内，并且没有引起该宿主植物明显病害症状的一 类真菌[1]。内生真菌与植物共生在自然界是非常普遍 的，在一些重要的林木、灌木与草本中相继发现了内 生真菌的存在，甚至在蕨类、苔藓、藻类中也有发现。 Petrini(1991)估算，每种植物平均大约有 4~5 种专性内 生真菌，而全世界内生真菌种类已达到在 100 万种以 上。目前，人们发现在近 80 属290 多种禾草中含有 内生真菌，所以禾草类内生真菌与宿主植物的关系受 到了广泛关注，这些内生真菌大部分属于子囊菌纲的 香柱菌属，其中从香柱菌属演化而来的无性型 Neotyphodium 与禾草的关系尤为密切，受到广泛关 注。 关于内生真菌对禾草的影响研究主要集中在与 内生真菌共生的两种人工禾草高羊茅(Festuca arun- dinacea Schreb.)和黑麦草(Lolium perenne L.)上，在对 高羊茅——内生真菌共生关系的研究中，多数学者以感 染内生真菌 Neotyphodium coenophialum的KY31 品种 为研究对象，已有的大量研究表明，内生真菌感染能 显著提高宿主高羊茅对非生物胁迫如干旱[2-5]、高温 [6]、盐碱[7]、刈割[8]、营养[9]等的耐性。 真菌种类不同，所具有的耐非生物胁迫特点也不 相同。如 Whiting 等人研究发现 Phaeoacremonium inflatipes 的最适生长温度是 30℃；在水势为–8.3 MPa 时，P. chlamydospora仍可以生长[10]。李婷等人发现 低质量浓度的铜镉处理(7.5 mg/L)均促进了 Boletus edulis 菌丝的生长[11]。Carvalho 等研究发现 Glomus geosporum 孢子在盐浓度为 20‰时比 10‰时有更强的 萌发力[12]。 在对菌根真菌和宿主植物相互关系的研究中，研 究者发现对高温、干旱等非生物胁迫具有很好抗性的 菌株也能够增强宿主植物的抗性。如 Subramanian 等 人发现 G. intraradices具有一定的抗旱性[13]，当将该 真菌接种到玉米并进行干旱实验后发现，接种组比对 照组具有较高的叶片水势和叶面积比以及较低的气 孔导度，显著提高了玉米的耐旱能力[14]。黄艺等人研 究发现，不同真菌对环境中的过量盐，具有不同的抗 性，如红绒盖牛肝在 0.1 mol/L Na2SO4中长势良好[15]， 对盐碱土生长下的油松接种红绒盖牛肝后发现，接种 植物生物量比未接种对照的生物量高出 43.58%[16]，大 大缓解了盐渍土壤对宿主植物的抑制作用。我国有丰 富的内生真菌资源，目前在我国的天然草地中发现含 有内生真菌的禾草已经有 13 属25种禾草[17]。具 有 抗 性的内生真菌菌株也有类似于菌根真菌中发现的提 高宿主植物抗性的能力，如Chunjie Li发现 N. coe- nophialum 在pH5 的培养基上不影响生长，在 pH3 时 能略有生长[18]，将含有该菌的高羊茅进行pH3 的酸性 胁迫，发现相比于对照，染菌组具有较高的生物量和 分蘖[19]。因此在体外条件下对不同来源的内生真菌进 行抗性筛选，不仅可以对内生真菌的抗性进行比较， 而且可以进一步将筛选的抗性内生真菌人工转接到 不感染内生真菌的植物中以提高其抗逆能力。 本文以从内蒙古草原广泛分布的野生牧草羽茅 (Achnatherum sibiricum (L.) Keng)和羊草(Leymus chinensis (Trin.) Tzvel.)中分离的内生真菌为研究对 象，并以分离自高羊茅中的模式菌株 N. coenophialum 为对照，在离体培养条件下，通过比较 3种内生真菌 在不同温度、盐分和渗透条件下的生长特性以探讨不 同种内生真菌的抗逆性差异及其对宿主植物可能存 在的有益作用，从而为揭示两者共生关系本质提供科 学依据。 2. 材料和方法 2.1. 材料 羊草和羽茅均为内蒙古中东部草原常见种，多数 地理种群中的羊草不感染内生真菌或感染率极低，只 有阿巴嘎旗种群的染菌率较高(最高达 80%)。而在此  天然禾草中三种内生真菌对非生物胁迫耐性的比较研究 分布区中的羽茅，内生真菌的感染率均接近于 100%[20,21]，只是其中的内生真菌种类随生境的不同有 所差异，在偏干旱的环境中，内生真菌 N. sibiricum 占优势，在水分充足的环境中，内生真菌 N. gansuense 占优势[22]。 供试菌种：分离自高羊茅的N. coenophialum 其 菌落白色毛毡状，质地紧密，气生菌丝较短，产孢少， 生长最慢；分离自羽茅的 N. gansuense菌落白色，绵 状疏松，气生菌丝较丰富，生长最快，是在中国发现 的第一个 Neotyphodium 内生真菌[23]；分离自羽茅的 N. sibiricum生长速率与 N. gansuense较大不同，生长 缓慢，质地紧密。分离自羊草的 N. sp.其菌落白色， 绵状疏松，气生菌丝较丰富，产孢多，生长较快。 2.2. 方法 2.2.1. 测定生长曲线 将四种内生真菌培养在 50 ml三角瓶中，每瓶添 加YM 液体培养基 40 ml，放在摇床上控制条件为 25 ℃，200 r/min。每天定时用剪过的枪头取 1 ml等分到 96 微孔板中，用酶联免疫检测仪在 630 nm处测定吸 光度值。以 YM 培养基的吸光度值为对照，用吸光度 值的平均值对时间(d)做四种内生真菌的标准生长曲 线，每天重复数 3瓶。 2.2.2. 温度处理 将四种内生真菌在 PDA培养基上 25℃培养几周 作为备用菌落。在 9 cm的培养皿中注入 PDA 培养基， 用3.7 mm的打孔器在备用菌落边缘打孔并注入到试 验用培养基中央。将培养皿分别置于 10℃、25℃、32 ℃、37℃下培养，每个处理重复 5次，一个月后测定 菌落直径。 2.2.3. 渗透胁迫处理 PEG 是一种惰性的非离子长链多聚体，易溶于 水，具有很强的吸水性，使溶液中水分子减少，从而 降低了溶液的渗透压，且PEG 无毒性，并且不能被内 生真菌吸收利用，因此可以作为渗透调节剂模拟干旱 胁迫。用聚乙二醇-6000( PEG 6000)调节渗透势[24]，通 过添加不同质量的 PEG 6000 可以形成不同的渗透胁 迫处理来模拟干旱胁迫。实验设定 6个处理梯度，浓 度分别为 0%、5%、10%、15%、20%、25% 。取 1 ml 对数期的菌液加入到三角瓶中，于摇床上 25℃，200 r/min 培养，每个处理重复 5次。待培养期末，用真空 抽滤机抽滤在滤纸上，并用蒸馏水冲洗数次，将菌丝 与滤纸置于烘箱内 80℃烘干至恒重，冷却后分析天平 称重。 2.2.4. 盐分处理 用NaCl 调节YM 培养基的盐分浓度。将N. sp. 与N. gansuense的盐浓度设定为 0、25、50、100、200、 300 mmol/L；N. sibiricum盐浓度设定为 0、250、500、 1000、1500、2000 mmol/L；KY31 的盐浓度设定为 0、 250、500、1000、1500、2000、3000 mmol/L。取 1 ml 对数期的菌液加入到三角瓶中，于摇床上 25℃，200 r/min 培养，每个处理重复 5次。待对照组菌丝长满后， 用真空抽滤机抽滤在滤纸上，并用蒸馏水将培养基冲 洗干净，将菌丝与滤纸置于烘箱内 80℃烘干至恒重， 冷却后分析天平称重。 2.3. 数据处理 采用 SPSS16.0 单因素方差分析来计算各处理对 不同内生真菌生长百分数的差异显著性。 3. 结果 3.1. 温度对内生真菌生长的影响 N. coenophialum，N. sp.，N. gans uense，N. sibiricum 四种内生真菌在 10℃和 32℃下都能生长，在25℃状 态下生长最好；在 37℃下只有 N. gansuense，N. si- biricum 略有生长。N. sp.，N. gans uen se，N. sibiricum 三种内生真菌 32℃的生长与 10℃时无显著差异，而 N. coenophialum在32℃时生长状况要显著差于10℃。 说明本实验所采用的 3种内生真菌与模式菌株相比具 有较好的耐高温特性(图1，图 2)。 3.2. PEG模拟干旱对内生真菌生长的影响 N. sp.与N. coenophialum在10% PEG浓度下都能 正常生长，在 15%浓度时基本不生长；N. gansuense， N. sibiricum在5%浓度处理下能够正常生长，在 10% 浓度时基本不能生长。对于分离自羊草的 N. sp.，5% 与10%浓度的 PEG 都能明显促进它的生长。而对于 羽茅中的两种菌 N. gansuense与N. sibiricum，N. gansuense 的耐旱性要优于 N. sibiricum(图3)。 Copyright © 2012 Hanspub 3  天然禾草中三种内生真菌对非生物胁迫耐性的比较研究 Copyright © 2012 Hanspub 4 c c a b c bc a b c bc a b c bc a bc -0.2 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 1.2 10 25 32 37 Te m p erature（℃） Percentage of growt h N. co eno phi alum N.sp. N.gansuense N.sibiricum Figure 1. Effect of different temperature on growth of four endophyte. Different letters indicate significant differences (P < 0.05) 图1. 不同温度条件下四种内生真菌的生长情况。图中的不同字母代表处理之间显著性差(P < 0.05) Figure 2. Effect of different temperature on growth of four endophyte, 10℃, 25℃, 32℃, 37℃. Different letters indicate different endophyte. (a) N. coenophialum; (b) N. sp.; (c) N. gansuense; (d) N. sibiricum 图2.不同温度条件下四种内生真菌的生长情况，每幅图中四列从左到右处理温度依次为10℃、25℃、32℃、37℃。不同字母代表四种菌。 (a) N. coenophialum；(b) N. sp.；(c) N. gansuense；(d) N. sibiricum c c c c b a 0 0.5 1 1.5 0%5%10% 15% 20%25% PEG concent ration Percenta ge of growth (d) a b a ccc 0 0.5 1 1.5 0%5%10%15% 20% 25% PEG concentration Percentage of growth (a) c c c a a b 0 0.5 1 1.5 2 2.5 0%5%10% 15% 20% 25% PEG concentra tion Percen tag e of gro wth (b) b b b b a a 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 1.2 0%5%10%15% 20% 25% PEG concentration Percentage of growth (c) Figure 3. Effect of different drought stress on growth of four endophyte. (a) N. coenophialum; (b) N. sp.; (c) N. gansuense; (d) N. sibiricum. Different letters indicate significant differences (P < 0.05) 图3. 不同PEG 浓度胁迫下四种内生真菌生长百分数。(a) N. coenophialum；(b) N. sp.；(c) N. gansuense；(d) N. sibiricum。图中的不同字 母代表处理之间显著性差异(P < 0.05)  天然禾草中三种内生真菌对非生物胁迫耐性的比较研究 3.3. 盐分胁迫对内生真菌生长的影响 由图 4可以看出，当氯化钠浓度达到 1.5 mol/L 时，N. coenophialum生长才开始受到抑制，在 3 mol/L 的浓度下，仍可以生长。N. sp.在50 mmol/L浓度时生 长良好，在 300 mmol/L氯化钠浓度时生长才受到显 著抑制。N. gansuense在200 mmol/L氯化钠浓度以下 时，生物量无明显变化，生长状况良好；但在低浓度 处理如 25 mmol/L、50 mmol/L 氯化钠浓度时，生物 量略有增加，当处理浓度达到300 mmol/L时，生长 受到抑制，差异显著。当盐浓度从 0~1 mol/L递增时， N. sibiricum生长并未呈现出抑制现象，可以看出其对 盐浓度变化的适应能力较强，当氯化钠浓度达到 1.5 mol/L 时，N. sibiricum 完全不能生长，3种内生真菌 耐盐能力由大到小的顺序为 N.sibiricum，N. sp.，N. gansuense。 4. 讨论 以人工禾草高羊茅和黑麦草为材料的大量研究 表明，内生真菌感染可以显著提高宿主植物的抗逆 性，比如干旱[5]、高温[6]和盐碱[7]胁迫等，而这些耐性 与Neotyphodium 属内生真菌的作用密切相关。已有研 究表明，对非生物胁迫具有优良耐性的菌根真菌也能 提高宿主植物的相应耐性。我国有丰富的内生真菌资 源，到目前为止，在天然草地中至少发现有 13 属25 种禾草带有内生真菌[25]，如果具优良耐性的内生真菌 也被证实能够增强禾草宿主的相应耐性，那么我们就 可以通过筛选抗性菌株，然后人工导入到天然禾草 中，以提高天然禾草的耐性。 通过与模式菌株比较发现，3种分离自我国天然 禾草中的内生真菌的耐高温、低温性无显著差异，均 优于模式菌株。四种 Neotyphodium属内生真菌的最适 生长温度都是 25℃，且在 10℃~32℃条件下都可以生 长，这与 White 等人(1987)报道的 N. coenophialum的 最适生长温度是 25℃相同[26]；Li(2006)发现 N. gan- suense 、 N. coenophialum菌的最适生长温度也是 25℃， 超过 35℃时菌落不能生长[18]。 我们对内生真菌进行渗透胁迫实验发现，羽茅中 的两种内生真菌 N. g ansuense与N. sibiricum，在 10% PEG 浓度下基本不能生长，但是 N. gansuense的耐旱 性略好于 N. sibiricum，但都不及 N. sp.和模式菌株的 耐旱性好。N. sp. 、 N. gansuense 、 N. sibiricum三种内 生真菌在耐渗透胁迫能力上与感染该种内生真菌的 植物表现相一致，本研究中内生真菌菌株 N. sp.是从 分布于较干旱的阿巴嘎旗羊草分界点分离获得，内生 真菌 N. gansuense 、 N. sibiricum从分布于较湿润生境 中的羽茅分离得到，从宿主植物所处的原生生境可 知，感染内生真菌的羊草的耐旱性明显好于羽茅的耐 旱性，这一结果与菌根真菌中的研究结果相一致，如 Morte 等人发现 Terfezia claveryi真菌具有一定耐旱 a a a a b b -0.2 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 1.2 02505001000 1500 2000 Treatment（mmol/L） Perce ntage o f growth (d) aaab ab c -0.3 0.2 0.7 1.2 050100 200 300 400 Treatment（mmol/L） Percentage of growth (c) aa ab ab bb 0 0.5 1 1.5 050100200 300 400 Treatment（mmol/L） Percentage of growth (b) a ab ab b cdd 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 1.2 02505001000 1500 2000 3000 Treatment（mmol/ L ） Percentage of growth (a) Figure 4. Effect of different salt stress on growth of four endophyte. (a) N. coenophialum; (b) N. sp.; (c) N. gansuense; (d) N. sibiricum. Dif- ferent letters indicate significant differences (P < 0.05) 图4. 不同氯化钠浓度胁迫四种内生真菌生长百分数。(a) N. coenophialum；(b) N. sp.；(c) N. gansuense；(d) N. sibiricum。图中的不同字母 代表处理之间显著性差异(P < 0.05) Copyright © 2012 Hanspub 5  天然禾草中三种内生真菌对非生物胁迫耐性的比较研究 性[27]，在含有该菌的植物 Helianthemum almeriense上 进行水分胁迫实验，在水分胁迫后期，菌根化植株的 水势、存活量、净光合、N、P、K含量等均比非菌根 化植物高[24]。 Carvalho 等[12]研究发现盐度的增加对 Glomus geosporum 孢子的萌发没有显著影响，且在盐浓度为 20‰ 时比 10‰时有更强的萌发力，将感染G. geosporum 的羊草进行盐碱胁迫发现，染菌植物具有 较高的根冠比和分蘖数[28]，即耐盐菌株的感染也显著 增强了宿主植物的耐盐性。本研究中，三种内生真菌 的耐盐性均不及模式菌株，N. coenophialum在3 mol/L 的氯化钠浓度下仍可以生长，表现出非常强的耐盐 性，宿主植物的耐盐性与内生真菌相类似，1% NaCl 浓度下，感染 N. coenophialum的高羊茅与未感染的相 比有更高的叶片存活率[7]。 总之，从天然禾草中获得的 3种内生真菌与模式 菌株相比较，耐高温的能力更强；耐渗透胁迫的能力 只有羊草中的 N. sp.与模式菌株接近，而羽茅中的两 种菌株的耐渗透胁迫能力却显著低于模式菌株，这与 野外观测到染菌羊草分布于较干旱的地区，而羽茅分 布于较湿润的生境下相符，不同种类内生真菌在渗透 胁迫方面的耐性与其宿主植物表现相一致；对于不同 的盐浓度胁迫，3种菌株的耐盐性都显著低于模式菌 株，而含有相应抗性菌株的羊草和高羊茅在该抗性方 面也具有相应的提高。对于天然禾草而言，内生真菌 是一个丰富的资源库，可以进行活体研究，通过体外 筛选不同优势的抗性菌株，人工导入到天然禾草中， 研究能否提高天然禾草的耐性，从而增加牧草的产 量，阐明内生真菌与天然禾草之间的相互关系将会对 生态农牧业带来巨大的经济效益和生态效益。 5. 致谢 感谢国家自然科学基金项目(No. 30970460)，教育 部高等学校博士学科点专项科研基金项目(No. 20090031110026)，教育部留学回国人员科研启动基金 项目(2009-2011)给予的基金支持。 参考文献 (References) [1] O. Petrini. Fungal endophytes of tree leaves. In: J. H. Andrews, S. S. Hirano, Eds, Microbial Ecology of Leaves. New York: Springer-Verlag, 1991: 179-197. [2] R. H. White, M. C. Engelke, S. J. Morton, et al. Acremonium endophyte effects on tall fescue drought tolerance. Crop Science, 1992, 6(32): 1392-1396. [3] S. G. Assuero, J. A. Tognetti, M. R. Colabelli, et al. Endophyte infection accelerates morpho-physiological responses to water deficit in tall fescue. New Zealand Journal of Agricultural Rea- search, 2006, 49(4): 359-370. [4] A. A. Elmi, C. P. West. Endophyte infection effects on stomatal conductance, osmotic adjustment and drought recovery of tall fescue. New Phytologist, 1995, 131(1): 61-67. [5] F. Bayat, A. Mirlohi and M. Khodambashi. Effects of endophytic fungi on some drought tolerance mechanisms of tall fescue in a hydroponics culture. Russian Journal of Plant Physiology, 2009, 56(4): 510-516. [6] 杜永吉, 王祺, 韩烈保. 内生真菌 Neotyphodium typhinum感 染对高羊茅光合特性的影响[J]. 生态环境学报, 2009, 18(2): 590-594. [7] M. R. Sabzalian, A. Mirlohi. Neotyphodium endophytes trigger salt resistance in tall and meadow Fescues. Journal of Plant Nu- trition and Soil Science, 2010, 173(6): 952-957. [8] D. P. Belesky, J. M. Fedders. Does endophyte influence re- growth of tall fescue? Annals of Botany, 1996, 78(4): 499-505. [9] P. C. Lyons, J. J. Evans and C. W. Bacon. Effects of the fungal endophyte Acremonium coenophialum on nitrogen accumulation and metabolism in tall fescue. Plant Physiology, 1990, 92(3): 726-732. [10] E. C. Whiting, A. Khan and W. D. Gubler. Effect of temperature and water potential on survival and mycelial growth of Phaeo- moniella chlamydospora and Phaeoacremonium spp. Plant Dis- ease, 2001(85): 195-201. [11] 李婷, 黄艺, 黄志基. 重金属胁迫下外生菌根真菌 Boletus edulis 重金 属 积 累 分配与生长微环境变化[J]. 生态环境, 2005, 14(6): 870-875. [12] L. M. Carvalho, P. M. Correia and M. A. Martins-loucao. Arbu- scular mycorrhizal fungal propagules in a salt marsh. Mycorr- hiza, 2004(14): 165-170. [13] K. S. Subramanian, C. Charest, L. M. Dwyer, et al. Effects of arbuscular mycorrhizae on leaf water potential, sugar content, and P content during drought and recovery of maize. Canadian Journal of Botany, 1997, 75(9): 1582-1591. [14] K. S. Subramanian, C. Charest, L. M. Dwyer, et al. Arbuscular mycorrhizas and water relations in maize under drought stress at tasselling. New Phytologist, 1995, 129(4): 643-650. [15] 黄艺, 姜学艳, 季海波等. 过量钠盐胁迫对种外生菌根真菌 生长和钠元素积累的影响[J]. 微生物学通报, 2004, 31(3): 45- 49. [16] 黄艺, 姜学艳, 梁振春等. 外生菌根真菌接种和施磷对油松 幼苗抗盐性的影响[J]. 生态环境, 2004, 13(4): 622-625. [17] 南志标, 李春杰. 禾草——内生真菌共生体在草地农业系统中 的作用[J]. 生态学报, 2004, 24(3): 605-616. [18] C. J. Li, Z. B. Nan and F. Li. Biological and physiological char- acteristics of Neotyphodium gansuense symbiotic with Ach- natherum inebrians. Microbiological Research, 2008, 163(4): 431-440. [19] G. P. Cheplick. Effect of simulated acid rain on the mutualism between tall fescue (Festuca arundinacea) and an endophytic fungus (Acremoniumco enophialum). International Journal of Plant Sciences, 1993, 154 (1): 134-143. [20] 张欣, 李熠, 魏宇昆等. 内蒙古中东部草原羽茅 Epichloe 属 内生真菌的分布及 rDNA-ITS 序列系统发育[J]. 生态学报, 2007, 27(7): 2904-2910. [21] 王银华, 任安芝, 魏宇昆等. 内蒙古中东部草原羽茅内生真 菌的分类[J]. 菌物学报, 2008, 27(6): 841-851. [22] 张欣. 内蒙古中东部草原羽茅种群内生真菌的多样性及与宿 主植物协同进化的研究[D]. 南开大学博士学位论文, 2009. [23] C. Li, Z. Nan, V. H. Paul, et al. A new Neotyphodium species symbiotic with drunken horse grass Achnatherum inebrians in China. Mycotaxon, 2004, 90(1): 141-147. Copyright © 2012 Hanspub 6  天然禾草中三种内生真菌对非生物胁迫耐性的比较研究 [24] O. Chazen, W. Hartung and P. M. Neumann. The different effects of PEG 6000 and NaCI on leaf development are asso- ciated with differential inhibition of root water transport. Plant, Cell & Environment, 1995, 18(7): 727-735. [25] Z. B. Nan, C. J. Li. Neotyphodium in native grasses in China and observations on endophyte host interaction. In: V. H. Paul, P. D. Dapprich, Eds., Proceedings of the 4th International Neoty- phodium Grass Interactions Symposium, Soest, 2000: 41-50. [26] J. F. White, G. Morgan-Jones. Endophyte-host associations in forage grasses. X. Cultural studies on some species of Acremo- nium sect. albo-lanosa, including a new species, A. starrii. My- cotaxon, 1987, 30: 87-95. [27] A. Morte, C. Lovisolo and A. Schubert. Effect of drought stress on growth and water relations of the mycorrhizal association Helianthemum almeriense-Terfezia claveryi. Mycorrhiza, 2000, 10(3): 115-119. [28] Y. F. Zhang, P. Wang, Y. F. Yang, et al. Arbuscular mycorrhizal fungi improve reestablishment of Leymus chinensis in bare sa- line-alkaline soil: Implication on vegetation restoration of ex- tremely degraded land. Journal of Arid Environments, 2011, 75(9): 773-778. Copyright © 2012 Hanspub 7 |