目的:采用外周血单个核上CD14 CD105双阳性细胞作为气道平滑肌干细胞表面标志,了解其与儿童喘鸣的关系,为哮喘的早期诊断提供依据。方法:随机选取5岁以下喘息的儿童,以同年龄组为对照组,用流式细胞仪测定外周血单个核CD14 CD105双阳性细胞。结果:35例喘鸣组患儿,CD14 CD105双阳性细胞为12.67% ± 5.56%,而30例对照组为4.84 ± 1.39%,有显著性意义(P < 0.01)。结论:喘息儿童中外周血CD14 CD105双阳性细胞比例显著高于正常对照组,提示儿童喘息与气道平滑肌干细胞增高之间可能有某种关联。 Objective: Using CD14 CD105 double positive cells as the surface markers of airway smooth muscle stem cells in peripheral blood mononuclear cells is to understand the relationship between asthma and wheezing in children, and to provide evidence for the early diagnosis of asthma. Methods: Randomly selecting 5-year-old children with wheezing, in the same age group as the control group, the CD14 CD105 double positive cells were measured by flow cytometry. Results: The CD14 CD105 positive cells of 35 cases were 12.67% ± 5.56%, while the control group was 4.84 ± 1.39%, which was significant (P < 0.01). Conclusion: The proportion of CD14 CD105 positive cells in the peripheral blood of asthmatic children was significantly higher than that in the normal control group, which suggested that there might be some correlation between the children wheezing and the increase of airway smooth muscle stem cells.
应延风1,吕美艳2,杜娟2,胡融融3
1金华职业技术学院,浙江 金华
2永康人民医院,浙江 永康
3永康市西城街道社区卫生服务中心,浙江 永康
收稿日期:2017年5月9日;录用日期:2017年5月28日;发布日期:2017年5月31日
目的:采用外周血单个核上CD14 CD105双阳性细胞作为气道平滑肌干细胞表面标志,了解其与儿童喘鸣的关系,为哮喘的早期诊断提供依据。方法:随机选取5岁以下喘息的儿童,以同年龄组为对照组,用流式细胞仪测定外周血单个核CD14 CD105双阳性细胞。结果:35例喘鸣组患儿,CD14 CD105双阳性细胞为12.67% ± 5.56%,而30例对照组为4.84 ± 1.39%,有显著性意义(P < 0.01)。结论:喘息儿童中外周血CD14 CD105双阳性细胞比例显著高于正常对照组,提示儿童喘息与气道平滑肌干细胞增高之间可能有某种关联。
关键词 :喘息,气道平滑肌干细胞,哮喘
Copyright © 2017 by authors and Hans Publishers Inc.
This work is licensed under the Creative Commons Attribution International License (CC BY).
http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/
目前研究已表明,在哮喘病人中存在气道重塑现象,表现为气道平滑肌增生,这些增生的气道平滑肌至少来源于二个方面,从原位纤维母细胞转化,或气道平滑肌干细胞经血流迁移到气道而形成 [
于本院门诊或住院的5岁以下喘息儿童35例,其中男20例,女15例,平均年龄2.4 ± 1.8岁,对照组约30例,其中男19例,女11例,平均年龄2.8 ± 2.3岁。纳入标准为临床可见喘息症状,同时肺部可闻及呼气期哮鸣音。排除标准:有各种并发症、营养不良和维生素D缺乏症、先天性疾病如支气管肺发育不良、先天性心脏病等。
随机选取符合选择条件病人,发作时抽取肝素抗凝外周血4 ml,进行气道平滑肌干细胞分离测定。具体方法简述如下:外周血用PBS稀释后按1:1的体积比缓慢叠加于单个核细胞分离液(HISTOPAQUE-1077)上,保持界面清晰,室温水平离心400 g,30 min后,吸取分离液与上层交界部位单个核细胞层。分别加入荧光直标的单克隆抗体PE-CD105、FITC-CD14、及相应的同型IgG (BD Biosciencesphamingen公司产品)作为对照,4℃下避光孵育30 min后,PBS洗涤并离心,用500 μL 10 g/L多聚甲醛重悬细胞后流式细胞仪(Bection Dikison FACS Calibur)检测,软件定量分析,阳性细胞率通过纠正对照的百分率计算。
结果如表1和图1所示:
结果表明外周血中喘鸣组患儿单个核CD14 CD105双阳性细胞比例显著高于正常对照组(P < 0.01)。
研究结果表明喘息儿童中外周血CD14 CD105双阳性细胞比例显著高于正常对照组,提示儿童喘息与CD14 CD105双阳性细胞增高之间可能有某种关联。
一般认为CD105是干细胞特有的表面标志,CD14表达于成熟细胞表面,二者的结合对气道平滑肌干细胞的判定有一定的价值。国内研究表明,外周血CD14和CD105双阳性的平滑肌祖细胞占贴壁细胞的71.8% ± 7.2%,并体外能稳定增殖,可进一步分化为平滑肌细胞 [
儿童喘息的出现可能与过度的外周血气道平滑肌干细胞增殖,并迁移进入气道,导致气道平滑肌增生,气道张力增大,易痉挛有关,Saunders [