目的:探讨FAK、PI3K、AKT、mTOR蛋白在胃癌组织中表达与临床病理及生存的关系。方法:应用免疫组化的方法检测50例胃癌组织、48例癌旁组织、20例正常胃组织中FAK、PI3K、p-AKT、p-mTOR蛋白的表达。结果:FAK、p-AKt、p-mTOR在胃癌组织中的表达高于癌旁组织、正常胃组织(P < 0.01),其表达水平与浸润深度、临床分期、淋巴结转移呈正相关(P < 0.01, r = 0.81),与组织分化类型呈负相关(P < 0.01, r = −0.85),与患者的性别、年龄、胃癌的部位无相关(P > 0.05);PI3K在胃癌组织中的表达高于癌旁组织、正常胃组织(P > 0.05),其表达水平与患者的性别、年龄、胃癌的部位、浸润深度、临床分期、淋巴结转移无相关(P > 0.05);生存分析显示,p-AKt、p-mTOR阳性表达与阴性表达患者的生存时间比较差异有统计意义(P < 0.01);FAK、PI3K阳性表达与阴性表达患者的生存时间比较差异无统计意义(P > 0.05)。结论:AKT、mTOR的异常表达参与了胃癌的演进过程,可能是胃癌患者预后的一个独立指标之一。 Object: To explore the relationship between the expression of FAK, PI3K, AKt and mTOR protein in gastric carcinoma and analyze the relationship with clinicopathology and survival. Methods: Im-munohistochemical method was used to detect the level of FAK, PI3K, p-AKt and p-mTOR protein in 50 cases of gastric carcinoma, 48 cases of tissue adjacent to carcinoma and 20 normal gastric tissues. Result: The level of FAK, p-AKt and p-mTOR in gastric cancer carcinoma was higher than that of tissue adjacent to carcinoma and normal gastric tissues (p < 0.01), its level was positively correlated with infiltration depth, clinical stage, lymph node metastasis (P < 0.01), and negatively correlated with the type of tissue differentiation (P < 0.01), was not correlated with the gender, age and gastric carcinoma area of patients ((P > 0.05); the level of PI3K in gastric carcinoma was higher than that of tissue adjacent to carcinoma and normal gastric tissue (P > 0.05), and the level was not correlated with the patient's gender, gastric carcinoma area, infiltration depth, clinical stage and lymph node metastasis (P > 0.05). Survival analysis shows, the survival time of patients with p-AKt, p-mTOR positive expression and negative expression was statistically significant (p < 0.01), and with FAK, PI3K negative expression was not statistically significant. Conclusion: The abnormal expression of AKt and mTOR is involved in the evolution of gastric carcinoma, which may be one of the independent indexes of prognosis of gastric carcinoma patients.
于波,孙玺媛*,陈宏,于铁夫,刘洪羽,曹维海,樊伟业,刘晓斌
齐齐哈尔市第一医院,黑龙江 齐齐哈尔
收稿日期:2018年6月20日;录用日期:2018年7月8日;发布日期:2018年7月16日
目的:探讨FAK、PI3K、AKT、mTOR蛋白在胃癌组织中表达与临床病理及生存的关系。方法:应用免疫组化的方法检测50例胃癌组织、48例癌旁组织、20例正常胃组织中FAK、PI3K、p-AKT、p-mTOR蛋白的表达。结果:FAK、p-AKt、p-mTOR在胃癌组织中的表达高于癌旁组织、正常胃组织(P < 0.01),其表达水平与浸润深度、临床分期、淋巴结转移呈正相关(P < 0.01, r = 0.81),与组织分化类型呈负相关(P < 0.01, r = −0.85),与患者的性别、年龄、胃癌的部位无相关(P > 0.05);PI3K在胃癌组织中的表达高于癌旁组织、正常胃组织(P > 0.05),其表达水平与患者的性别、年龄、胃癌的部位、浸润深度、临床分期、淋巴结转移无相关(P > 0.05);生存分析显示,p-AKt、p-mTOR阳性表达与阴性表达患者的生存时间比较差异有统计意义(P < 0.01);FAK、PI3K阳性表达与阴性表达患者的生存时间比较差异无统计意义(P > 0.05)。结论:AKT、mTOR的异常表达参与了胃癌的演进过程,可能是胃癌患者预后的一个独立指标之一。
关键词 :胃癌,FAK/PI3K/AKt/mTOR,病理特征,预后
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胃癌是全球最常见的恶性肿瘤之一,病死率居恶性肿瘤的第3位,在我国,胃癌病人占世界胃癌病人的比例超过43% [
随机收集2010年1月至2010年12月齐齐哈尔市第一医院行手术切除并经病理证实、 临床资料完整的胃癌石蜡标本50例,癌旁组织48例,正常胃组织20例,术前均未行放化疗。男性36例,女性14 例,年龄34~82岁,中位年龄64岁,≤60岁23例,>60岁27例。术后所制切片由专职病理科医生进行复检,标本组织学类型以世界卫生组织(WHO)分类2000标准。组织分化程度:低分化腺癌20例,中分化腺癌24例,高分化腺癌6例;病灶部位:贲门部癌1例,胃底部癌1例,胃体部癌19例,幽门部癌29;浸润深度:未穿透浆膜层(T1 + T2) 13例,穿透浆膜层(T3 + T4):37例;有淋巴结转移19例,无淋巴结转移31例。根据美国癌症联合会(AJCC) 2010年第7版为准进行肿瘤分期(TNM分期),I期17例,II期26例,III期4,IV期3例。通过医院伦理委员会批准。
兔抗人FAK、p-AKT、PI3K、p-mTOR、FAK单克隆抗体购自美国Santa Cruz公司;生物素标记山羊抗兔(Ⅱ抗)、辣根酶标记的链霉卵白素工作液、山羊血清封闭液、DAB-显色试剂盒均购自北京中杉金桥生物技术有限公司。
检测胃癌组织、癌旁组织(距离肿瘤组织5.0 cm)、正常胃组织中FAK、PI3K、p-AKT、p-mTOR蛋白的表达。免疫组化采用S-P二步法进行,按照免疫组化试剂盒说明书进行。
通过显微镜对染色结果进行判断,首先将低倍镜下的染色情况拍摄下来,被染色为棕黄色或者是棕褐色的细胞为阳性,进行判定时采用 的评价方法是综合评分方法。标准如下:按照切片着色深浅进行评分,棕褐色为3分,棕黄色2分,浅黄色1分,无着色0分;按照阳性细胞比例 进行评分,比例在76%~100%之间为4分,在51%~75%之间为3分,26%~50%之间为2分,1%~25%之间为1分,总比例小于1%为0分。将两种评分标准所得分数相加即为调查分数,总得分为在5分以上为强阳性,总得分在2~4分之间为弱阳性,总得分在1分以下为阴性 [
采用SPSS统计软件进行处理.采用卡方检验进行相关性分析、Kaplan-Meier方法进行生存期分析,P < 0.05为差异有统计学意义。
FAK蛋白主要表达于细胞浆,在胃癌组织、癌旁组织、正常胃组织的表达率分别为68%、14.95%、25%,P < 0.01,胃癌组织与癌旁组织、正常胃组织比较,p < 0.01,差异有统计学意义,癌旁组织与正常胃组织比较,p > 0.05,差异无统计学意义;PI3K蛋白主要表达于细胞膜,在胃癌组织、癌旁组织、正常胃组织的表达率分别为28%、18.75%、10%,胃癌组织与癌旁组织、正常胃组织比较,P > 0.05,差异无统计学意义;p-AKT蛋白主要表达于细胞膜,在胃癌组织、癌旁组织、正常胃组织的表达率分别为70%、25%、5%,胃癌组织与癌旁组织、正常胃组织比较P < 0.01,差异有统计学意义,癌旁组织与正常胃组织比较,p > 0.05,差异无统计学意义;义p-mTOR蛋白主要表达于细胞浆,在胃癌组织、癌旁组织、正常胃组织的表达率分别为54%、18.55%、0%,胃癌组织与癌旁组织、正常胃组织,P < 0.01,差异有统计学意义,癌旁组织与正常组织比较,p < 0.05,差异有统计学意义,见表1、图1~图4。
图1. FAK蛋白在胃癌组织、癌旁组织、正常胃组织中表达(×200)。(A) 胃癌组织;(B) 癌旁组织;(C) 正常胃组织;(D) 阴性对照
图2. PI3K蛋白在胃癌组织、癌旁组织、正常胃组织中表达(×200)。(A) 胃癌组织;(B) 癌旁组织;(C) 正常胃组织;(D) 阴性对照
图3. p-AKT蛋白在胃癌组织、癌旁组织、正常胃组织中表达(×200)。(A) 胃癌组织;(B) 癌旁组织;(C) 正常胃组织;(D) 阴性对照
组别 | n | FAK | PI3K | P-AKt | P-mTOR | ||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
阳性 | 阴性 | 阳性率 | 阳性 | 阴性 | 阳性率 | 阳性 | 阴性 | 阳性率 | 阳性 | 阴性 | 阳性率 | ||
胃癌组织 | 50 | 34 | 16 | 68.00%*# | 14 | 36 | 28.00% | 35 | 15 | 70.00%*# | 27 | 23 | 54.00%*# |
癌旁组织 | 48 | 18 | 30 | 14.95% | 9 | 29 | 18.75% | 12 | 36 | 25.00% | 9 | 39 | 18.75%& |
正常胃组织 | 20 | 5 | 15 | 25.00% | 2 | 18 | 10.00% | 1 | 19 | 5.00% | 0 | 20 | 0.00% |
表1. FAK、PI3K、p-AKT、p-mTOR蛋白在胃癌组织、癌旁组织、正常胃组织中的表达
*与癌旁组织比较P < 0.01;#与正常组织比较P < 0.01;&与正常组织比较P < 0.01。
FAK、p-AKT、p-mTOR蛋白的表达与浸润深度、临床分期、淋巴结转移呈正相关,与组织分化类型呈负相关,与胃癌患者的性别、年龄、胃癌的部位之间差异无统计学意义;PI3K蛋白的表达与胃癌患者的性别、年龄、胃癌的部位、浸润深度、临床分期、淋巴结转移之间差异无统计学意p > 0.05,见表2。
图4. p-mTOR蛋白在胃癌组织、癌旁组织、正常胃组织中表达(×200)。(A) 胃癌组织;(B) 癌旁组织;(C) 正常胃组织;(D) 阴性对照
病理特征 | n | FAK | PI3K | p-AKt | p-mTOR | ||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
阳性 | 阴性 | 阳性率 | 阳性 | 阴性 | 阳性率 | 阳性 | 阴性 | 阳性率 | 阳性 | 阴性 | 阳性率 | ||
性别 | |||||||||||||
男 | 36 | 30 | 6 | 83.33% | 10 | 26 | 27.78% | 25 | 11 | 69.44% | 17 | 19 | 47.20% |
女 | 14 | 10 | 4 | 71.43 | 4 | 10 | 28.57% | 10 | 4 | 71.43% | 7 | 7 | 50.00% |
年龄 | |||||||||||||
≤60 | 23 | 16 | 7 | 69.56% | 9 | 13 | 43.47% | 15 | 8 | 65.22% | 10 | 13 | 43.48% |
>60 | 27 | 22 | 5 | 81.48% | 6 | 21 | 22.22% | 20 | 7 | 74.08% | 12 | 15 | 44.44% |
胃癌部位 | |||||||||||||
胃体 | 49 | 33 | 16 | 67.34% | 14 | 35 | 28.57% | 34 | 15 | 69.38% | 34 | 15 | 69.39% |
贲门 | 1 | 1 | 0 | 100% | 0 | 1 | 0 | 1 | 0 | 1000% | 1 | 0 | 100% |
组织分化类型 | |||||||||||||
高 | 6 | 1 | 5 | 16.67%** | 0 | 6 | 0 | 2 | 3 | 33.33%** | 2 | 4 | 33.33%** |
中 | 24 | 13 | 8 | 54.17& | 7 | 17 | 29.17% | 12 | 12 | 50.00% | 17 | 7 | 29.27% |
低 | 20 | 11 | 9 | 55.00% | 6 | 14 | 30% | 13 | 7 | 65.00% | 12 | 8 | 60.00% |
未 | 4 | 3 | 1 | 75.00% | 0 | 4 | 0 | 2 | 1 | 50.00% | 3 | 1 | 75.00% |
分期 | |||||||||||||
I | 17 | 3 | 15 | 17.64% | 5 | 12 | 29.41% | 3 | 14 | 17.64% | 2 | 15 | 11.76% |
II | 26 | 11 | 15 | 42.30% | 7 | 19 | 26.92% | 13 | 13 | 50.00% | 12 | 14 | 46.15% |
III | 4 | 2 | 2 | 50.00% | 0 | 4 | 0 | 4 | 0 | 100% | 2 | 2 | 50.00% |
IV | 3 | 2 | 1 | 66.67% | 0 | 3 | 0 | 3 | 0 | 100% | 2 | 1 | 66.67% |
浸润深度 | |||||||||||||
T1 + T2 | 13 | 4 | 9 | 30.76%* | 5 | 8 | 35.71% | 3 | 10 | 23.07%** | 2 | 11 | 15.35%** |
T2 + T3 | 37 | 24 | 13 | 64.86 | 10 | 27 | 27.02% | 27 | 10 | 72.97% | 25 | 12 | 67.57% |
淋巴结转移 | |||||||||||||
无 | 19 | 5 | 14 | 26.31%** | 5 | 14 | 26.31% | 7 | 12 | 36.84%* | 6 | 13 | 31.57%** |
有 | 31 | 23 | 8 | 74.19% | 9 | 22 | 29.03% | 24 | 7 | 77.41 | 22 | 9 | 70.97 |
表2. FAK、PI3K、p-AKt、p-mTOR表达与胃癌病理特征的关系(*p < 0.05, **P < 0.01)
*P < 0.05,**P < 0.01。FAK、PI3K、p-AKt、p-mTOR阳性表达患者的平均生存时间分别是39.8、58.6、26.3、29.8个月,阴性表达患者的平均生存时间分别是49.8、48.7、58.2、53.7个月,经过Log Rank统计学检验,p-AKt、p-mTOR阳性表达与阴性表达患者的生存时间比较差异有统计意义p < 0.05,见图5~图8。
图5. FAK表达与生存时间的关系(1阳性2,阴性)
图6. PI3K表达与生存时间的关系(1阳性,2阴性)
图7. p-AKt表达与生存时间的关系(1阳性,2阴性)
图8. m-TOR表达与生存时间的关系(1阳性,2阴性)
FAK/PI3K/AKt/mTOR信号通路与人类肿瘤发生、发展密切相关 [
黑龙江省齐齐哈尔市社会发展攻关,项目编号:SFGG-201571。
于 波,孙玺媛,陈 宏,于铁夫,刘洪羽,曹维海,樊伟业,刘晓斌. FAK/PI3K/AKt/mTOR信号通路相关蛋白在胃癌中的表达及意义 The Expression and Significance of FAK/PI3K/AKt/mTOR Signaling Pathway Related Proteins in Human Gastric Carcinoma[J]. 世界肿瘤研究, 2018, 08(03): 113-120. https://doi.org/10.12677/WJCR.2018.83018