本试验系参照卫生署「健康食品之调节血脂功能评估方法」,进行牛樟芝菌丝体粉末复方之血脂调节功能评估试验。募集高胆固醇血症患者(TC > 200 mg/dL)进行人体试验,实验设计分组为服用产品的介入组(Intervention group)以及服用以炒熟面粉代替产品的安慰剂组(Placebo group),依照产品服用指示一天两次、一次两颗的方式持续两个月。于试验前(观察期, Month 0)以及服用产品或安慰剂一个月(介入一个月, Month 1)、两个月(介入两个月, Month 2)三个时间点抽血检测生化项目,记录受试者基本体位以及饮食纪录。试验期间要求受试者不得更改饮食以及运动的习惯,以达到实验的客观性。实验主要是观察受试者于服用产品前后血清(或血浆)中的血脂指标:三酸甘油酯(Triacylglycerol, TG)、总胆固醇(Cholesterol, TC)、高密度脂蛋白胆固醇(High Density Lipoproteins Cholesterol, HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(Low Density Lipoprotein Cholesterol, LDL-C)是否有改善。同时也会观察其低密度脂蛋白胆固醇氧化延迟时间(LDL oxidative lag time)是否有因产品介入而延长。另一方面,监控受试者的肝功能指数(Glutamate Oxaloacetate Transaminase, GOT、Glutamic Pyruvic Transaminase, GPT)、肾功能指数(Creatinine, Cr、Blood Urea Nitrogen, BUN)以及空腹血糖来评估产品对人体的影响。在观察期(Month 0),介入组与安慰剂组间无论在基本体位、饮食习惯以及各项血清(或血浆)生化检测数值均无差别。而受试者开始服用产品或安慰剂后,不论是介入一个月(Month 1)或两个月(Month 2),均可观察到介入组的总胆固醇(TC)以及低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)相较于观察期(Month 0)有显著的减少,且与同一时间的安慰剂组比较也具有显著性的减少(p < 0.05),三酸甘油酯(TG)和低密度脂蛋白胆固醇氧化延迟时间(LDL oxidative lag time)则无观察到显著的变化。高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)虽然在组间并无显著差异,但与观察期(Month 0)相比是显著的减少,经计算低密度与高密度脂蛋白胆固醇的比例(LDL-C/HDL-C),显示相较于高密度胆固醇,低密度胆固醇的下降幅度更显著,因此推测高密度脂蛋白胆固醇是伴随着总胆固醇的减少而减少。根据实验结果,在此人体试验模式下,牛樟芝菌丝体粉末复方具有显著改善血中总胆固醇及低密度脂蛋白胆固醇浓度的功效,有助于降低未来心血管疾病发生风险。<br/>Objective: This study was conducted to assess the prenatal developmental blood lipid-lowering effects of an Antrodia cinnamomea mycelia powder complex according to the safety assessment guideline of Health Food announced by Ministry of Health and welfare, Executive Yuan of Taiwan. Methods: A total of 32 hyperlipidemia individuals with TC > 200 mg/dl were randomly divided into intervention group (n = 16) and placebo group (n = 16). Dietary intervention was provided for the intervention group for 2 months. Information on dietary intakes, physical examinations and blood samples was collected. Serum lipids were assayed at baseline and endpoint of the study period. Subjects take two capsules of A. cinnamomea mycelia powder complex or placebo twice a day. The study has 2 weeks run in period, 8 weeks intervention period, and 4 weeks follow-up period. All subjects measure body weight, body fat, blood pressure and biochemical parameters, including triglycerides (TG), total cholesterol (TC), low density lipoprotein in cholesterol (LDL-C), high density lipoprotein in cholesterol (HDL-C), blood sugar, kidney and liver function. Results: The results were found after 8 weeks intervention, the plasma total cholesterol and LDL-C were significantly decreased compared with the initial, and there was significantly difference (p < 0.05) compared with the placebo group. LDL-C/HDL-C and triglyceride level has a decreasing trend. Conclusion: A. cinnamomea mycelia powder complex could decrease blood lipids.
朱心彤1,蔡文城2,赵敞3,陈劲初1,4,5,6*
1葡萄王生技股份有限公司,台湾 桃园
2台美检验科技有限公司,台湾 新北
3上海葡萄王企业有限公司,上海
4实践大学食品营养与保健生技学系,台湾 台北
5台湾大学食品科技研究所,台湾 台北
6中原大学生物科技学系,台湾 桃园
收稿日期:2019年1月2日;录用日期:2019年1月13日;发布日期:2019年1月21日
本试验系参照卫生署「健康食品之调节血脂功能评估方法」,进行牛樟芝菌丝体粉末复方之血脂调节功能评估试验。募集高胆固醇血症患者(TC > 200 mg/dL)进行人体试验,实验设计分组为服用产品的介入组(Intervention group)以及服用以炒熟面粉代替产品的安慰剂组(Placebo group),依照产品服用指示一天两次、一次两颗的方式持续两个月。于试验前(观察期, Month 0)以及服用产品或安慰剂一个月(介入一个月, Month 1)、两个月(介入两个月, Month 2)三个时间点抽血检测生化项目,记录受试者基本体位以及饮食纪录。试验期间要求受试者不得更改饮食以及运动的习惯,以达到实验的客观性。实验主要是观察受试者于服用产品前后血清(或血浆)中的血脂指标:三酸甘油酯(Triacylglycerol, TG)、总胆固醇(Cholesterol, TC)、高密度脂蛋白胆固醇(High Density Lipoproteins Cholesterol, HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(Low Density Lipoprotein Cholesterol, LDL-C)是否有改善。同时也会观察其低密度脂蛋白胆固醇氧化延迟时间(LDL oxidative lag time)是否有因产品介入而延长。另一方面,监控受试者的肝功能指数(Glutamate Oxaloacetate Transaminase, GOT、Glutamic Pyruvic Transaminase, GPT)、肾功能指数(Creatinine, Cr、Blood Urea Nitrogen, BUN)以及空腹血糖来评估产品对人体的影响。在观察期(Month 0),介入组与安慰剂组间无论在基本体位、饮食习惯以及各项血清(或血浆)生化检测数值均无差别。而受试者开始服用产品或安慰剂后,不论是介入一个月(Month 1)或两个月(Month 2),均可观察到介入组的总胆固醇(TC)以及低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)相较于观察期(Month 0)有显著的减少,且与同一时间的安慰剂组比较也具有显著性的减少(p < 0.05),三酸甘油酯(TG)和低密度脂蛋白胆固醇氧化延迟时间(LDL oxidative lag time)则无观察到显著的变化。高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)虽然在组间并无显著差异,但与观察期(Month 0)相比是显著的减少,经计算低密度与高密度脂蛋白胆固醇的比例(LDL-C/HDL-C),显示相较于高密度胆固醇,低密度胆固醇的下降幅度更显著,因此推测高密度脂蛋白胆固醇是伴随着总胆固醇的减少而减少。根据实验结果,在此人体试验模式下,牛樟芝菌丝体粉末复方具有显著改善血中总胆固醇及低密度脂蛋白胆固醇浓度的功效,有助于降低未来心血管疾病发生风险。
关键词 :高血脂,樟芝菌丝体,低密度脂蛋白胆固醇
Copyright © 2019 by author(s) and Hans Publishers Inc.
This work is licensed under the Creative Commons Attribution International License (CC BY).
http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/
现今饮食型态趋向于高脂低纤,然而此种饮食型态,容易增加血液中低密度脂蛋白胆固醇(Low Density Lipoprotein Cholesterol; LDL-C)浓度,当LDL-C浓度超过130 mg/dL或LDL-C/HDL-C的比值 > 3.5时,LDL-C堆积在血管内皮细胞上,使血管内皮细胞受到伤害,长期堆积造成动脉粥状硬化,成为心血管疾病及脑血管疾病的高危险群 [
牛樟芝菌丝体粉末(A. cinnamomea Mycelia Powder)为购自食品工业发展研究所生物资源与保存中心(新竹市,台湾)之BCRC35398:葡萄王公司自传统发酵干燥获得。牛樟芝培养于1 L PDB培养基中,经25℃、14天培养后,以500 L发酵槽培养,培养基为2%葡萄糖、2%黄豆粉、0.1% yeast extract、0.05% MgSO4、0.05% KH2PO4、25℃、30 rpm培养10~14天发酵全液冷冻干燥备用。
牛樟芝菌丝体粉末复方包含牛樟芝菌丝体粉末、红曲粉末、纳豆发酵萃取物、姜黄萃取物、辅酶Q10及红景天萃取物,实验前已完成卫生福利部第三类安全性试验。对照物质以炒熟面粉代替试验物质(于后简称为安慰剂)。
经台北医学大学暨附属医院联合人体研究伦理委员会审核通过后,共招募32位受试者,介入与安慰剂组各16位。受试者年龄约在18~75岁之间,甲状腺机能正常,接受抽血筛检,确定血液TC浓度 > 200 mg/dL,参与试验期间,受试者按原饮食习惯摄食,且不得有明显干扰血脂质因子之生活习惯(含运动量改变)。介入组与安慰剂组平行试验,单盲且随机分组。介入组每天共4颗试验物质,于早晚餐后服用,每次2颗;安慰剂组每天摄取相同数量胶囊,形状、颜色、外观同试验物质。试验时间共3个月,包含1个月观察期(Month 0),2个月介入期(Month 1、2)。
受试者于试验前一晚空腹10小时以上,试验当天早上抽血检验确认受试者是否为高胆固醇血症(血液总胆固醇 > 200 mg/dL)。确认之后,研究人员向受试者说明计划进行步骤与目的,受试者签署同意书后方才纳入实验。于观察期(Month 0),填写基本资料(年龄、疾病史、用药纪录、活动量),再进行体位测量(身高、体重、体脂肪)及血压测量;使用采血笔采取空腹微血管血液,以血糖机测量血糖值;并由专业医检师进行抽血(采血部位为上臂静脉),缴交3日饮食纪录给营养师进行营养评估。研究期间所有血液生化值由台美检验科技有限公司进行分析。于观察期(Month 1、2),受试者每日服用4颗牛樟芝菌丝体粉末复方或是安慰剂,早晚餐后服用每且次两粒。每个月测量受试者体重、体脂肪、血压、血糖、其他血液生化值,并记录三日饮食摄取量和用药情况,同时于抽血同一天接受营养师咨询。
监测身高、体重、体脂、血压及血糖。血液生化检查项目:总胆固醇、三酸甘油酯、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、血清尿素氮、肌酸酐、麸草醋酸转胺酶、麸丙酮酸转胺酶。
测量LDL-C对氧化之稳定度,采铜离子诱导LDL-C氧化之延滞期(Lag phase)方法。超高速分离低密度脂蛋白之制备 [
受试者于观察期(Month 0)、介入期(Month 1、2)抽血当周,于周一至周五任选二天、周末或周日任选一天纪录所有饮食摄取量。营养师收得饮食记录本后,成分数据库的营养素分析软件进行营养素分析(御厨皇,台中)。
利用SAS 9.1版软件进行统计分析,数值以平均值 ± 标准偏差表示,使用paired t-test及unpaired t-test 进行组间统计分析,当P < 0.05时代表结果具有统计上的意义。
受试者于抽血当周将进行详细三日饮食纪录,分别纪录一个假日及两个非假日,将饮食纪录以台湾地区食品营养成分数据库的营养素分析软件(御厨皇,台中)进行营养素分析。收集介入组及安慰剂组受试者于观察期(Month 0)、介入期(Month 1、2)两个阶段之三日饮食纪录,见表1,介入组及安慰剂组两组间饮食热量摄取量、三大营养素和占热量百分比以unpaired f-test检定皆无显着差异。以paired f-test检定介入组与安慰剂组于Month 0、Month 1、Month 2之热量、蛋白质、脂质、碳水化合物摄取无显着差异。
Item | Group | Month 0 | Month 1 | Month 2 |
---|---|---|---|---|
Energy (Kcal) | 介入组 安慰剂组 | 1426.1 ± 440.6 1468.6 ± 459.7 | 1521.1 ± 578.7 1610.6 ± 459.7 | 1511.9 ± 475.0 1700.7 ± 781.9 |
Protein (g) | 介入组 安慰剂组 | 57.8 ± 15.1 55.7± 26.1 | 53.0 ± 15.5 63.7 ± 21.0 | 55.1 ± 21.9 64.2 ± 32.5 |
Lipid (g) | 介入组 安慰剂组 | 50.4 ± 21.3 54.1 ± 28.9 | 44.2 ± 21.2 56.7 ±20.0 | 53.7 ± 29.5 60.0 ± 36.0 |
Carbohydrate (g) | 介入组 安慰剂组 | 183.2 ± 68.1 192.0 ± 64.9 | 205.0 ± 97.6 205.9 ± 75.0 | 1187.0 ± 54.8 214.3 ± 104.6 |
Protein (% of energy) | 介入组 安慰剂组 | 16.6 ± 5.8 14.9 ± 3.8 | 15.8 ± 4.1 16.3 ± 3.6 | 15.1 ± 1.8 15.6 ± 1.8 |
Lipid (% of energy) | 介入组 安慰剂组 | 31.6 ± 7.5 31.9± 9.9 | 27.8 ± 6.6 31.8 ± 6.7 | 31.4 ± 10.0 31.6 ± 6.4 |
Carbohydrate (% of energy) | 介入组 安慰剂组 | 51.8 ± 11.3 53.2 ± 11.3 | 56.2 ± 8.0 51.8 ± 7.2 | 53.5 ± 10.7 52.8 ± 7.0 |
表1. 受试者三日饮食纪录1
1Values are mean ± SD.
测量体重、身体质量指数(Body mass index, BMI)、体脂肪、血压。以unpaired t-test检定介入组与安慰剂组两组间之体重、身体质量指数、体脂肪、血压于 Month 0、Month 1、Month 2,皆无显着差异。其中介入组之收缩压Month 0与Month 2相比,由127.94 ± 20.5显着下降至119.2 ± 22.3 mm/Hg,详见表2。
介入组与安慰剂组之血清GOT、GPT数值在研究期间,数值皆落于正常范围内,以unpaired t-test检定两组间皆无显着差异,见表3。
介入组与安慰剂组之血液尿素氮BUN、血清肌酸酐Cr数值于研究期间落于正常范围内,以unpaired t-test检定两组间皆无显着差异,见表3。
血清总胆固醇,TC:介入组与安慰剂组之TC浓度于Month 1、Month 2两组间以unpaired t-test检定具显着差异。TC浓度标准范围介于120~200 mg/dL间,介入组之TC浓度在Month 0、Month 1、Month 2 分别为220.8 ± 19.0、186.0 ± 12.2、194.94 ± 29.8 mg/dL,以paired t-test检定发现,产品介入后Month 1、Month 2与Month 0分析比较皆有显着减少,即产品在介入后TC浓度能维持在标准范围120~200 g/dL。安慰剂组Month 2 (234.3 ± 31.5 mg/dL)较Month 0显着上升,见表3。
Item | Group | Month 0 | Month 1 | Month 2 |
---|---|---|---|---|
BW (Kg) | 介入组 安慰剂组 | 64.0 ± 16.0 57.5± 10.7 | 63.8 ± 15.6 57.4 ± 11.3 | 63.4 ± 15.2 57.2 ± 11.2 |
BMI (Kg/m2) | 介入组 安慰剂组 | 24.7 ± 5.0 22.6 ± 3.4 | 24.6 ± 4.9 22.6 ± 3.6 | 24.4 ± 4.7 22.5 ± 3.5 |
BF (%) | 介入组 安慰剂组 | 30.0 ± 7.5 29.8 ± 4.6a | 29.1 ± 7.5 31.7 ± 9.2ab | 29.3 ± 8.0 28.8 ± 5.0b |
SBP (mm/Hg) | 介入组 安慰剂组 | 127.9 ± 20.5a 120.5 ± 16.8 | 124.7 ± 27.1ab 115.3 ± 17.7 | 119.2 ± 22.3b 113.7 ± 19.4 |
DBP (mm/Hg) | 介入组 安慰剂组 | 75.9 ± 11.3 74.9 ± 10.5a | 72.3 ± 11.5 68.4 ± 13.5b | 70.9 ± 15.6 65.2 ± 9.8b |
表2. 受试者基本体位测量1
1Values are mean ± SD. BH, Body height; BW, Body weight; BMI, Body mass index, BW (Kg)/BH (m2); BF, Body fat; SBP, Systolic blood pressure; DBP, Diastolic blood pressure. abcValues with different superscripts are significantly different at p < 0.05 by paired t-test.
Item | 参考数值 | Group | Month 0 | Month 1 | Month 2 |
---|---|---|---|---|---|
GOT (U/L) | <45 | 介入组 安慰剂组 | 23.9 ± 4.7 23.9± 6.7 | 26.5 ± 4.9 22.9 ± 5.5 | 25.4± 6.9 22.6 ± 5.7 |
GPT (U/L) | <35 | 介入组 安慰剂组 | 25.6 ± 9.9 23.1 ± 12.6 | 27.1 ± 8.3 21.3 ± 8.4 | 28.0 ± 13.3 21.4 ± 7.6 |
BUN (mg/dL) | F:7~17 M:9~20 | 介入组 安慰剂组 | 13.2 ± 3.1ab 12.2 ± 2.3a | 12.5 ± 2.9b 13.9 ± 3.4a | 13.6 ± 3.9a 13.2 ± 3.1ab |
Cr (mg/dL) | F:0.52~1.04 M:0.66~1.25 | 介入组 安慰剂组 | 0.8 ± 0.2a 0.7 ± 0.1a | 0.7 ± 0.2b 0.7 ± 0.1b | 0.7 ± 0.2b 0.7 ± 0.7a |
TC (mg/dL) | 120-200 | 介入组 安慰剂组 | 220.8 ± 19.0a 225.4 ± 24.5b | 186.0 ± 12.2b 235.3 ± 31.5ab↑ | 194.9 ± 29.8b 246.4 ± 34.5a↑ |
TG (mg/dL) | 35-165 | 介入组 安慰剂组 | 120.6 ± 45.6 105.4 ± 44.7 | 111.4 ± 40.6 110.2 ± 49.4 | 110.6 ± 48.1 119.6 ± 61.2 |
HDL-C (mg/dL) | >40 | 介入组 安慰剂组 | 69.9 ± 16.6a 71.5 ± 16.7a | 65.8 ± 14.2b 69.0 ± 13.7ab | 63.0 ± 11.3b 67.2 ± 14.3b |
LDL-C (mg/dL) | <130 | 介入组 安慰剂组 | 146.6 ± 25.4a 146.8 ± 30.9b | 101.0 ± 18.3c 147.8 ± 34.7b↑ | 117.0 ± 30.5b 162.6 ± 32.9a↑ |
LDL-C/HDL-C | 介入组 安慰剂组 | 2.3 ± 0.8a 2.2 ± 0.8b | 1.6 ± 0.6c 2.3 ± 0.7b↑ | 2.0 ± 0.7b 2.6 ± 0.8a↑ | |
FBS (mg/dL) | 介入组 安慰剂组 | 97.8 ± 9.4 95.8 ± 5.2 | 99.3 ± 9.1 97.7 ± 11.9 | 101.1 ± 7.6 98.4 ± 8.3 |
表3. 受试者血液生化值1
1Values are mean ± SD. abcValues with different superscripts are significantly different at p < 0.05 by paired t-test. ↑Values with different superscripts are significantly different at p < 0.05 by unpaired t-test.
三酸甘油酯,TG:介入组与安慰剂组之TG浓度于研究期间,无论是以unpairedt-test检定两组间,或以paired t-test检定各组3个时间点间,皆无发现显着差异,见表3。
高密度脂蛋白胆固醇浓度,HDL-C:介入组与安慰剂组之HDL-C浓度分别于Month 0、Month 1、Month 2间皆无统计差异,两组间以unpaired f-test检定亦无显着差异,见表3。
低密度脂蛋白胆固醇浓度,LDL-C:介入组与安慰剂组之LDL-C浓度于Month 1、Month 2两组间以unpaired t-test检定具显着差异。介入组之LDL-C浓度在Month 0、Month 1、Month 2分别为146.6 ± 25.4、101.0 ± 18.3、117.0 ± 30.5 mg/dL,以paired t-test检定发现,Month 1、Month2与Month 0比较皆有显着下降,LDL-C浓度维持在标准范围130 mg/dL内,表示产品在介入后,能降低LDL-C浓度,见表3。
LDL-C/HDL-C比值:介入组与安慰剂组之LDL-C/HDL-C比值于Month 1、Month 2两组间以unpaired t-test检定具显着差异。介入组之LDL-C/HDL-C比值在Month 0、Month 1、Month 2分别为2.3 ± 0.8、1.6 ± 0.6、2.0 ± 0.7,以paired t-test检定发现,Month 1、Month 2与Month 0比较皆显着下降,表示产品在介入后,能降低LDL-C/HDL-C比值,见表3。
血糖指标(Fasting blood glucose, FBS):介入组与安慰剂组之FBS浓度于研究期间,无论是以unpaired f-test检定两组间,或以paired t-test检定各组3个时间点间,皆无发现显着差异,见表3。
LDL-C Lag time:介入组与安慰剂组之LDL-C Lag time于Month 0、Month 1、Month 2,以unpaired t-test检定表示两组间皆无显着差异。以paired t-test检定介入组之LDL-C Lag time在Month 0 (106.0 ± 13.3 mins)与Month 1 (119.9 ± 15.4 mins)、Month 2 (118.4 ± 9.8 mins)数值,发现Month 1、Month 2数值分别显着高于Month 0,表示介入产品对LDL-C氧化延迟时间不具影响,见图1。
图1. 受试者各时间点血液中低密度脂蛋白胆固醇氧化延迟时间
介入组受试者之TC变化率在产品介入期间Month 1、Month 2分别为−17.29% ± 12.17%、−13.02% ± 19.47%,产品有效率分别为87.50%、68.75%,表示产品介入后能有效的降低血中TC浓度。LDL-C变化率则在产品介入期间Month 1、Month 2分别为−30.92% ± 6.52%、−20.43% ± 14.62%,产品有效率分别为100.00%、81.25%,表示产品介入后能有效的改善血中LDL-C之浓度。另外,介入组不论是在TC变化率与LDL-C变化率,负面效应(adverse effect)在组人数中比例皆不超过20%,因此不影响产品在调节TC浓度与LDL-C浓度的功效宣称,见表4。
Item | Month | The rate of change (%)a | The effect of treatmentb | ||
---|---|---|---|---|---|
Positive | No | Adverse | |||
TC | M1 M2 | −17.29 ± 12.17 −13.02 ± 19.47 | 14 (87.50%) 11 (68.75%) | 2 (12.50%) 3 (18.75%) | 0 (0.00%) 2 (12.50%) |
LDL-C | M1 M2 | −30.92 ± 6.52 −20.43 ± 14.62 | 16 (100.00%) 13 (81.25%) | 0 (0.00%) 2 (12.50%) | 0 (0.00%) 1 (6.25%) |
表4. 介入组之TC与LDL-C有效率分析
aCompare with month 0 (baseline). Values are mean ± SD. bValue present as number (%).
本研究为介入组与安慰剂组平行试验,采随机分组、单盲,产品介入前后,每日平均摄取热量和三大营养素摄取量和占热量百分比皆无统计差异,表示二组受试者在实验期间饮食摄取状况并无显着改变。体重、身体质量指数、体脂肪、血压皆与血脂质有关。体重过重、身体质量指数高、体脂肪量多,容易造成高血压或是血中TC、TG、LDL-C浓度增加以及HDL-C浓度减少,导致冠状动脉心脏病的发生 [
根据实验结果,在此人体试验模式下,牛樟芝菌丝体粉末复方具有显着改善血中总胆固醇及低密度脂蛋白胆固醇浓度的功效,持续服用产品对肝功能指数(GOT、GPT)、肾功能指数(Cr、BUN)以及空腹血糖浓度(FBS)皆不具影响。有助于降低未来心血管疾病发生风险。
朱心彤,蔡文城,赵 敞,陈劲初. 牛樟芝菌丝体粉末复方在调节人体血脂之探讨Evaluation of Blood Lipid-Lowering Effects of Antrodia cinnamomea Mycelia Powder Complex[J]. 食品与营养科学, 2019, 08(01): 17-26. https://doi.org/10.12677/HJFNS.2019.81003